Variación metodológica y diurna a corto plazo en proteínas de superficie y de carga en vesículas extracelulares...

Área de la Ciencia:

• Bioquímica; Biotecnología; Diagnóstico Médico

Sus antecedentes:

• Las vesículas extracelulares (VE) muestran promesa como biomarcadores de enfermedades.; La caracterización de la variabilidad técnica y biológica en estudios de VE es crucial.; Los factores preanalíticos como el momento de la recolección de sangre pueden afectar la confiabilidad de los biomarcadores de VE.

Objetivo del estudio:

• Cuantificar sistemáticamente la variabilidad metodológica y biológica en las mediciones de VE.; Evaluar el impacto de la recolección de sangre diurna (mañana vs. tarde) en los biomarcadores de VE.; Evaluar EV-Array, análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA) y espectrometría de masas (LC-MS/MS) para la caracterización de VE.

Principales métodos:

• Muestras de plasma de seis adultos sanos recolectadas por la mañana y por la tarde.; Análisis utilizando EV-Array para proteínas de superficie.; Aislamiento de VE seguido de NTA para tamaño y concentración de partículas, y LC-MS/MS para carga proteómica.

Principales resultados:

• Alta repetibilidad metodológica para NTA (3.3% CV) y LC-MS (8.2% CV), menor para EV-Array (22.6% CV).; La variación entre muestras (5-21%) fue menor que la variación entre sujetos.; No se observó un sesgo diurno sistémico significativo en el tamaño, concentración o carga de las VE; se observaron reducciones menores en algunos marcadores de superficie en las muestras de la tarde.

Conclusiones:

• El momento de la recolección de sangre diurna no introduce un sesgo sistémico importante en los biomarcadores de VE en individuos sanos.; La variabilidad individual y la estandarización metodológica son críticas para una investigación robusta de biomarcadores de VE.; Se necesitan estudios adicionales para confirmar efectos diurnos menores en marcadores de superficie de VE específicos.