Ingeniería de complejos VHH bispecíficos de cadena ramificada ("Dendrocuerpos") utilizando emparejamientos SpyCatcher...

Área de la Ciencia:

• Biotecnología; Inmunología; Ingeniería de anticuerpos

Sus antecedentes:

• Los anticuerpos bispecíficos (bsAbs) muestran una gran promesa en la dirección de las células inmunitarias hacia las células tumorales.; Los anticuerpos de dominio único (VHH) en tándem en los bsAbs pueden sufrir una actividad reducida debido al impedimento estérico de las regiones de unión al antígeno.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar una novedosa arquitectura de complejo VHH, el dendrocuerpo, para superar el impedimento estérico en los bsAbs.; Crear una plataforma modular para la construcción de terapéuticos bispecíficos y multiespecíficos basados en VHH.

Principales métodos:

• Se utilizaron sistemas ortogonales SpyCatcher/SpyTag y SnoopCatcher/SnoopTag para la unión de VHH en C-terminal.; Se generó un dendrocuerpo bispecífico anti-CD3/anti-EGFR mediante ligación en un solo paso.; Se evaluó el plegamiento del complejo, la estabilidad térmica y la unión al antígeno mediante interferometría de biolamina.

Principales resultados:

• El dendrocuerpo exhibió un plegamiento correcto y alta estabilidad térmica (Tm = 56 °C).; Demostró una fuerte unión a EGFR y citotoxicidad selectiva mediada por células T contra células cancerosas con EGFR positivo.; Se confirmó la especificidad del antígeno y la modularidad con una variante dendrocuerpo-CD16/EGFR.

Conclusiones:

• El marco del dendrocuerpo proporciona una estrategia para la construcción de bsAbs basados en VHH con una interferencia estérica minimizada.; Este enfoque mejora la adaptabilidad funcional y el potencial terapéutico para el tratamiento del cáncer.