La orientación de dCas9-SunTag a un promotor del gen de susceptibilidad es suficiente para la interferencia de CRISPR

Área de la Ciencia:

• Patología vegetal patología vegetal.
• La epigenética es la epigenética.
• Biología molecular La biología molecular.

Sus antecedentes:

• La enfermedad de rayas marrones de la yuca (CBSD) afecta significativamente a la agricultura del África subsahariana.
• La infección por patógenos a menudo se basa en factores de susceptibilidad del huésped.
• Trabajos anteriores demostraron el potencial de la metilación del ADN para reducir las enfermedades al atacar los genes de susceptibilidad.

Objetivo del estudio:

• Investigar la metilación dirigida del ADN como una estrategia para conferir resistencia a la CBSD en la yuca.
• Para dirigirse a los promotores de los factores esenciales del huésped para la infección por ipomovirus.

Principales métodos:

• Utilizó un sistema dCas9-DRMcd-SunTag para la orientación simultánea del promotor y la metilación del ADN.
• Centrado en dos genes claves de la familia eIF4E (nCBP-1 y nCBP-2) cruciales para la infección por ipomovirus.
• Se evaluó la reducción de la expresión génica y los posibles efectos de interferencia de CRISPR.

Principales resultados:

• Se logró con éxito la orientación simultánea del promotor y la metilación de nCBP-1 y nCBP-2.
• La reducción observada en la expresión génica, con controles que indican la interferencia CRISPR también contribuyó.
• Líneas establecidas para futuras investigaciones para segregar los reactivos de metilación y evaluar la heredabilidad.

Conclusiones:

• La metilación dirigida del ADN, junto con la interferencia de CRISPR, puede reducir la expresión de los factores esenciales del huésped viral.
• Se necesitan más investigaciones para confirmar la heredabilidad y la única eficacia de la metilación del ADN para la resistencia a la CBSD.