Método de fraccionamiento de flujo asimétrico de flujo de flujo de campo de múltiples detectores para mezclas de...

Área de la Ciencia:

• La nanomedicina y el suministro de medicamentos.
• Química Analítica La Química Analítica es un campo de estudio de la química analítica.
• Biotecnología La biotecnología es la biotecnología.

Sus antecedentes:

• Las nanopartículas basadas en lípidos (LNP) son vitales para nuevas terapias, incluidas las terapias génicas y las vacunas de ARNm.
• Los métodos analíticos estandarizados son esenciales para el control de calidad de LNP y la aprobación regulatoria.
• La caracterización fisicoquímica de los LNP es fundamental para su transición exitosa de la investigación a la aplicación clínica.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un protocolo robusto para el análisis físico-químico de LNPs utilizando Frit-Inlet Flow Asymmetric Flow Field-Flow Fraccionamiento (FI-AF4).
• Para caracterizar el tamaño, la morfología y la polidispersidad de LNP en presencia de medios biológicos.
• Evaluar la idoneidad de diferentes modelos de ajuste de dispersión de luz multiángulo (MALS) para subpoblaciones de LNP.

Principales métodos:

• Se desarrolló un método de fraccionamiento de flujo de flujo de campo asimétrico de entrada de Frit (FI-AF4) para separar nanopartículas basadas en lípidos (LNPs).
• Los detectores en línea que incluyen Ultravioleta (UV), Multi-Angle Light Scattering (MALS) y Dynamic Light Scattering (DLS) fueron acoplados con FI-AF4.
• El tamaño preliminar de las partículas y la polidispersidad se evaluaron utilizando DLS y análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA) para guiar el desarrollo del método.

Principales resultados:

• La técnica FI-AF4-UV-MALS-DLS separó con éxito los LNP de los medios que contienen proteínas (albúmina sérica bovina).
• El análisis simultáneo en línea reveló distintas subpoblaciones de LNP no detectables por otros métodos.
• El análisis de la morfología de las partículas mostró diferencias significativas entre las subpoblaciones, con modelos de esfera recubierta y bobinas aleatorias que proporcionan el mejor ajuste (R2 > 0,95).

Conclusiones:

• El desarrollado protocolo FI-AF4-UV-MALS-DLS ofrece un método robusto y versátil para la caracterización fisicoquímica de LNP.
• Este método permite un análisis detallado de los atributos de LNP, incluidos el tamaño y la morfología, apoyando el control de calidad y el cumplimiento normativo.
• La implementación de este protocolo ayuda a generar datos confiables esenciales para el desarrollo de fármacos LNP desde el banco hasta la cama.