Determinación de los subtipos C de gentamicina en la perilinfa del oído interno utilizando cromatografía líquida con...

Área de la Ciencia:

• Química analítica Química analítica es la que
• Farmacología Farmacología.

Sus antecedentes:

• La gentamicina es un antibiótico aminoglucósido de amplio espectro vital.
• La cuantificación precisa de la gentamicina en los fluidos biológicos es esencial para el monitoreo terapéutico de fármacos y los estudios farmacocinéticos.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y validar un método novedoso, sensible y rápido de cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa (RP-HPLC).
• Para permitir la determinación simultánea de los subtipos C de gentamicina utilizando la derivación de OPA-etanetiol.
• Para cuantificar la gentamicina en pequeños volúmenes de muestras biológicas, específicamente perilinfa del oído interno del ratón.

Principales métodos:

• Desarrollo de un método isocrático RP-HPLC utilizando una columna C18.
• Optimización de la composición de la fase móvil (metanol, ácido acético, 1-heptanesulfonato de sodio).
• Derivación de gentamicina con O-ftalaldehído (OPA) y etanetiol para la detección de fluorescencia.

Principales resultados:

• El método demostró una excelente linealidad (10-400 ng/mL) en perilinfa artificial.
• Se logró una alta sensibilidad con un límite de detección (LOD) de 0,2 ng/mL y un límite de cuantificación (LOQ) de 10-11 ng/mL para los cuatro subtipos principales de gentamicina C.
• El método fue validado con éxito de acuerdo con las pautas de USP para la selectividad, la linealidad, la exactitud, la precisión y la sensibilidad.
• Aplicación exitosa en la cuantificación de gentamicina en muestras de perilinfa de ratón.

Conclusiones:

• Se estableció un método simple, rápido y sensible RP-HPLC-fluorescencia para el análisis de gentamicina.
• La nueva derivación de OPA-etanetiol permite la determinación simultánea de los subtipos C de gentamicina.
• Este método validado es adecuado para la cuantificación de gentamicina en pequeños volúmenes de muestras biológicas, especialmente en la investigación preclínica.