Video Experimental Relacionado
Updated: Feb 13, 2026
06:55
A High-throughput Platform for the Screening of Salmonella spp./Shigella spp.
Published on: November 7, 2018
9.5K
Protocolo para identificar la red de señalización de los segundos mensajeros de nucleótidos en Shigella sonnei
Binbin Cui1, Xiayu Chen2, Mingfang Wang2
1Pharmacy Department, The Affiliated LiHuiLi Hospital of Ningbo University, Ningbo 315046, China; School of Pharmaceutical Sciences (Shenzhen), Shenzhen Campus of Sun Yat-sen University, Sun Yat-sen University, Shenzhen 518107, China.
STAR protocols
|February 11, 2026
Resumen
Este estudio detalla un protocolo para la detección de las redes de señalización de AMP cíclico (cAMP) y di-GMP cíclico (c-di-GMP) en Shigella sonnei. Los métodos permiten un análisis exhaustivo de estos cruciales sistemas de segundo mensajero bacteriano.
Área de la Ciencia:
- Microbiología Microbiología.
- Biología Molecular Biología Molecular
- La bioquímica es la bioquímica.
Sus antecedentes:
- Los sistemas de señalización de segundos mensajeros bacterianos, incluidos el AMP cíclico (cAMP) y el di-GMP cíclico (c-di-GMP), desempeñan funciones críticas en la regulación de diversos procesos celulares.
- La comprensión de estas redes de señalización es esencial para descifrar la fisiología bacteriana y la patogénesis.
- Shigella sonnei, un importante patógeno humano, depende de complejas vías de señalización para su supervivencia y virulencia.
Objetivo del estudio:
- Presentar un protocolo completo para la detección y análisis de las redes de señalización cAMP y c-di-GMP en Shigella sonnei.
- Proporcionar una metodología estandarizada para los investigadores que estudian los sistemas de segundo mensajero bacteriano.
Principales métodos:
- Termoforesis a microescala (MST) para el análisis de la unión.
- PCR cuantitativa de transcripción inversa (RT-qPCR) para el análisis de la expresión génica.
- Cromatografía líquida de ultra alto rendimiento y espectrometría de masas (LC-MS) para la cuantificación de metabolitos.
- Ensayo de desplazamiento de movilidad electroforética (EMSA) para las interacciones ADN-proteína.
- Ensayo de dos híbridos de adenilato ciclasa bacteriana (BACTH) para las interacciones proteína-proteína.
- Acoplamiento molecular para el análisis computacional.
Principales resultados:
- El protocolo presentado integra con éxito múltiples técnicas para permitir la detección de los componentes de la red de señalización cAMP y c-di-GMP.
- El estudio proporciona un marco para caracterizar la interacción entre estos dos sistemas clave de segundo mensajero en Shigella sonnei.
- Las interacciones moleculares específicas y los mecanismos reguladores dentro de la red de señalización se pueden dilucidar utilizando este protocolo.
Conclusiones:
- El protocolo desarrollado ofrece un enfoque robusto y versátil para estudiar las redes de señalización de segundo mensajero bacteriano.
- Esta metodología facilita una comprensión más profunda de los mecanismos moleculares que rigen la patogénesis de Shigella sonnei.
- El protocolo puede adaptarse para investigar sistemas de señalización similares en otras especies bacterianas.
Videos de Conceptos Relacionados
01:15Amplifying Signals via Second Messengers
8.8K
Many receptor binding ligands are hydrophilic; they do not cross the cell membrane but bind to cell-surface receptors. Thus, their message must be relayed by second messengers present in the cell cytoplasm. There are several second messenger pathways, each with its own way of relaying information. For example, the G protein-coupled receptors can activate both phosphoinositol and cyclic AMP (cAMP) second messenger pathways. The phosphoinositol pathway is active when the receptor induces...
8.8K
01:12What are Second Messengers?
90.8K
Because many receptor binding ligands are hydrophilic, they do not cross the cell membrane and thus their message must be relayed to a second messenger on the inside. There are several second messenger pathways, each with their own way of relaying information. G-protein coupled receptors can activate both phosphoinositol and cyclic AMP (cAMP) second messenger pathways. The phosphoinositol path is active when the receptor induces phospholipase C to hydrolyze the phospholipid,...
90.8K
01:08Nucleotide Excision Repair
40.9K
Overview
40.9K
01:21Cell-surface Signaling
54.7K
Hormones—or any molecule that binds to a receptor, known as a ligand—that are lipid-insoluble (water-soluble) are not able to diffuse across the cell membrane. In order to be able to affect a cell without entering it, these hormones bind to receptors on the cell membrane. When a first messenger, a hormone, binds to a receptor, a signal cascade is set off, causing second messengers, proteins inside the cell, to become activated, resulting in downstream effects.
54.7K
02:26Protein Networks
4.6K
An organism can have thousands of different proteins, and these proteins must cooperate to ensure the health of an organism. Proteins bind to other proteins and form complexes to carry out their functions. Many proteins interact with multiple other proteins creating a complex network of protein interactions.
These interactions can be represented through maps depicting protein-protein interaction networks, represented as nodes and edges. Nodes are circles that are representative of a protein,...
These interactions can be represented through maps depicting protein-protein interaction networks, represented as nodes and edges. Nodes are circles that are representative of a protein,...
4.6K
01:30Bacterial Signaling
41.3K
Bacterial signaling can occur within bacteria (intracellular) or between bacteria (intercellular). At times, a group of bacteria behaves like a community. To achieve this, they engage in quorum sensing, the perception of higher cell density that causes changes in gene expression. Quorum sensing involves both extracellular and intracellular signaling. The signaling cascade starts with a molecule called an autoinducer (AI). Individual bacteria produce AIs that move out of the bacterial cell...
41.3K