CEP290 está asociado con la accesibilidad de la cromatina del virus de la hepatitis B cccDNADNA cccDNA

Área de la Ciencia:

• Virología Virología.
• La epigenética es la epigenética.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• El ADN circular covalentemente cerrado del virus de la hepatitis B (VHB) (cccDNA) es una plantilla nuclear persistente para la transcripción viral.
• Los mecanismos que rigen la accesibilidad de la cromatina del HBV cccDNA no se comprenden bien, lo que afecta la persistencia viral.

Objetivo del estudio:

• Para investigar los estados de la cromatina de HBV cccDNA utilizando ATAC-seq de una sola célula en hepatocitos infectados.
• Para identificar los factores del huésped, como CEP290, que regulan la accesibilidad del cccDNA y la replicación del VHB.

Principales métodos:

• El ATAC-seq unicelular se realizó en hepatocitos humanos infectados por el VHB.
• La manipulación genética mediada por CRISPR/Cas9 (nockdown y activación) se utilizó para evaluar la función CEP290.
• Los estudios de terapia de combinación incluyeron CEP290 knockdown con entecavir o siRNA dirigido al HBV.

Principales resultados:

• Se identificaron regiones discretas cerradas de cromatina dentro del cccDNA del HBV.
• Cromatina abierta en loci específicos de cccDNA correlacionados con CEP290 elevado y otra expresión génica.
• CEP290 reguló positivamente los niveles de cccDNA y de ADN total del VHB, e influyó en la accesibilidad de la cromatina.
• El bloqueo combinado de CEP290 con tratamientos antivirales redujo el cccDNA, pero no lo eliminó.

Conclusiones:

• CEP290 y otros factores de huésped identificados pueden desempeñar un papel en la regulación del HBV cccDNA y la replicación viral.
• El perfil de cromatina de una sola célula es una herramienta valiosa para descubrir los factores del huésped involucrados en la persistencia del VHB.
• Dirigirse a CEP290 presenta una estrategia potencial para el manejo de la infección por HBV, aunque la eliminación completa no se logró con los métodos actuales.