Selección de un Aptámero de Alta Afinidad para Faloidina y Aplicación en un Aptasensor Dual de LRET/Colorimétrico

Área de la Ciencia:

• Química Analítica
• Biotecnología
• Ciencia de los Alimentos

Sus antecedentes:

• La faloidina de los hongos Amanita representa riesgos significativos para la seguridad alimentaria debido a la posible identificación errónea.
• Los métodos de detección existentes para la faloidina son limitados, sin que se hayan reportado previamente sistemas basados en aptámeros.

Objetivo del estudio:

• Aislar un aptámero de ADN de alta afinidad para la detección de faloidina.
• Desarrollar un aptasensor dual versátil para la cuantificación sensible y fiable de faloidina.

Principales métodos:

• Selección de un aptámero de ADN (Apt-PHD) mediante 15 rondas de Capture-SELEX.
• Caracterización de las interacciones aptámero-diana utilizando ITC, ensayo SYBR Green I, espectroscopía CD y acoplamiento molecular.
• Desarrollo de un aptasensor dual de transferencia de energía por resonancia de lantánidos (LRET)/colorimétrico que utiliza nanopartículas de upconversion y nanopartículas de oro.

Principales resultados:

• Se aisló Apt-PHD con alta afinidad (constantes de disociación en rango de nM) y especificidad.
• El aptasensor dual logró bajos límites de detección (12,6 pg/mL para LRET, 18,0 pg/mL para colorimétrico).
• El sensor demostró excelente reproducibilidad, selectividad frente a micotoxinas y recuperación precisa en muestras de hongos fortificadas.

Conclusiones:

• Este trabajo presenta el primer sistema de reconocimiento basado en aptámeros para la faloidina.
• La plataforma de detección óptica dual desarrollada permite la detección rápida, fiable y desplegable en campo de toxinas de moléculas pequeñas.
• Esta tecnología mejora la vigilancia de la seguridad alimentaria al proporcionar una herramienta sensible para la detección de toxinas.