Evaluación de la actividad de la acetilcolinesterasa en una interfaz líquido|líquido polarizable

Área de la Ciencia:

• Electroquímica
• Bioquímica
• Química Analítica

Sus antecedentes:

• La acetilcolinesterasa (AChE) es crucial para la neurotransmisión y es un objetivo para las neurotoxinas.
• La monitorización de la actividad de la AChE es vital para las evaluaciones ambientales y de salud.
• Los métodos existentes para el análisis de proteínas en interfaces líquido|líquido (ITIES) a menudo se centran en la adsorción o los cambios conformacionales.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar un método electroquímico novedoso para la monitorización en tiempo real de la actividad de la AChE en una ITIES.
• Detectar directamente la acetilcolina (ACh+) y la colina (Ch+) sin mediadores.
• Evaluar la actividad y la inhibición de la AChE en matrices complejas como el agua de mar sintética.

Principales métodos:

• Voltampetría de transferencia iónica en una interfaz líquido|líquido polarizable (ITIES).
• Detección electroquímica directa del sustrato iónico (ACh+) y del producto de hidrólisis (Ch+).
• Estudios de inhibición enzimática utilizando malatión.

Principales resultados:

• Se demostró la detección electroquímica directa y en tiempo real de ACh+ y Ch+ en la ITIES.
• Se confirmó que la AChE retiene la actividad catalítica en el tampón Trizma y en agua de mar sintética.
• Se cuantificó la inhibición de la AChE por malatión, mostrando efectos dependientes de la concentración.

Conclusiones:

• La ITIES es una plataforma versátil para estudiar la cinética y la inhibición enzimática.
• Este enfoque electroquímico permite la monitorización directa de la actividad enzimática en entornos complejos.
• El método tiene potencial para el desarrollo de biosensores para contaminantes neurotóxicos.