Inmunolabelamiento 3D de las válvulas aórticas humanas mediante el aclaramiento de tejido CUBIC optimizado y su...

Área de la Ciencia:

• Biología Cardiovascular Biología Cardiovascular
• La neurociencia es la neurociencia.
• Imágenes biomédicas de imágenes.

Sus antecedentes:

• La estenosis calcifica de la válvula aórtica (CAVS) implica cambios estructurales significativos en la válvula aórtica.
• El panorama neuroanatómico del CAVS no se entiende bien.
• Los métodos de imágenes actuales luchan con los tejidos mineralizados en CAVS.

Objetivo del estudio:

• Desarrollar y optimizar una técnica de imagen 3D para visualizar la arquitectura neuronal en válvulas aórticas humanas calcificadas.
• Para superar las limitaciones de los protocolos estándar de limpieza de tejidos en tejidos mineralizados.
• Investigar la distribución y organización de los nervios dentro del CAVS.

Principales métodos:

• Combinación de cócteles mejorados de imágenes cerebrales claras y sin obstrucciones y limpieza de tejidos computacional (CUBIC) con química SWITCH-Off / On.
• Química SWITCH integrada antes de la descalcificación y coincidencia del índice de refracción para mejorar el procesamiento de tejidos.
• Utilizó microscopía de fluorescencia de lámina de luz para reconstrucciones 3D de alta resolución.

Principales resultados:

• Se logra la deslipidación uniforme, la preservación de la fluorescencia y el etiquetado del tejido profundo en las válvulas aórticas mineralizadas.
• Visualizó con éxito distribuciones neuronales heterogéneas y organizadas espacialmente.
• Demostró una tasa de éxito del 80% en reconstrucciones 3D de alta resolución.

Conclusiones:

• El método de imagen desarrollado proporciona una plataforma robusta para estudiar la inervación de la válvula aórtica en CAVS.
• Reveló ideas sobre el panorama neuroanatómico de la enfermedad valvular cardíaca.
• Abre nuevas perspectivas para las intervenciones neuro-dirigidas en la enfermedad valvular del corazón y la investigación de mecanosensing.