Mitigación de la carga basada en reglas de autoensamblaje de anticuerpos monoclonales desencadenados por asimetría

Área de la Ciencia:

• Desarrollo Biofarmacéutico de Desarrollo Biofarmacéutico
• Química de las proteínas química de las proteínas.
• Ciencia de la formulación Ciencia de la formulación.

Sus antecedentes:

• El autoensamblaje no específico de anticuerpos monoclonales (mAbs) es un desafío crítico en el desarrollo biofarmacéutico.
• Los análisis actuales a menudo se centran en la región variable, pasando potencialmente por alto la contribución de la región constante a la agregación.
• Comprender la distribución de carga mAb de longitud completa es crucial para predecir y controlar el autoensamblaje.

Objetivo del estudio:

• Investigar la relación entre la asimetría de carga en toda la superficie mAb y su propensión al autoensamblaje.
• Para determinar cómo la distribución de la carga influye en las interacciones proteína-proteína y la formación de partículas sub-visibles.
• Proporcionar una base para el diseño racional de la formulación para evitar la agregación no deseada de mAb.

Principales métodos:

• Selección de tres mAbs con asimetría de carga variable.
• Evaluación de la autointeracción utilizando dispersión de rayos X de ángulo pequeño (SAXS), dispersión de luz dinámica (DLS) e imágenes de microflujo.
• Análisis del autoensamblaje en función de la concentración de mAb y la fuerza iónica.

Principales resultados:

• Los mAbs con dominios de carga opuesta Fab y Fc exhibieron atractivas interacciones proteína-proteína y formaron diversas morfologías sub-visibles.
• La propensión al autoensamblaje varió de manera no lineal con la concentración de mAb y la fuerza iónica para estos mAbs.
• Un mAb con dominios Fab y Fc de carga similar mostró un comportamiento repulsivo y ningún autoensamblaje significativo.

Conclusiones:

• La distribución de la carga en toda la superficie mAb, incluida la región constante, afecta significativamente la propensión al autoensamblaje.
• La identificación de la asimetría de carga es clave para predecir y mitigar la agregación no deseada de mAb.
• Este enfoque permite el desarrollo racional de formulaciones de mAb estables.