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Updated: Feb 24, 2026
08:25
Detection of Cell-Free DNA in Blood Plasma Samples of Cancer Patients
Published on: September 9, 2020
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Optimización preanalítica del ADN libre de células y del ADN extracelular derivado de vesículas para la detección de
Jonas Dohmen1, Lucrezia De Santis1, Bret M Stephens2
1Department of Surgery, University of Bonn, Germany.
Molecular oncology
|February 22, 2026
Resumen
El ADN extracelular derivado de vesículas (evDNA) muestra una mayor resiliencia que el ADN libre de células (cfDNA) en condiciones de biopsia líquida subóptimas. La estandarización de los flujos de trabajo y el procesamiento rápido son cruciales para un perfil y un monitoreo de tumores confiables.
Área de la Ciencia:
- Diagnóstico molecular El diagnóstico molecular es el diagnóstico molecular.
- Oncología Oncología.
- La bioquímica es la bioquímica.
Sus antecedentes:
- Las biopsias líquidas ofrecen perfiles de tumores no invasivos y monitoreo de la enfermedad.
- Los factores preanalíticos tienen un impacto significativo en el rendimiento analítico de la biopsia líquida.
- Las comparaciones directas entre el ADN libre de células (cfDNA) y el ADN extracelular derivado de vesículas (evDNA) son limitadas.
Objetivo del estudio:
- Evaluar de manera prospectiva las variables preanalíticas que afectan al cfDNA y al evDNA.
- Para comparar la estabilidad y el rendimiento de cfDNA versus evDNA.
- Identificar las condiciones óptimas para la detección confiable de mutaciones en biopsias líquidas.
Principales métodos:
- Evaluación prospectiva del retraso en el procesamiento, la temperatura de almacenamiento, el tipo de tubo y el volumen de plasma en cfDNA y evDNA de 244 pacientes con cáncer.
- El análisis se realizó utilizando ddPCR, Qubit y TapeStation.
- Validación en 723 muestras de plasma archivadas.
Principales resultados:
- evDNA demostró una mayor resiliencia que el cfDNA en condiciones subóptimas.
- El almacenamiento a temperatura ambiente condujo a cambios en el cfDNA después de 24 horas y en el evDNA después de 48 horas (prospectiva), o antes en el análisis retrospectivo.
- La refrigeración (4°C) conserva mejor la calidad del ADN que la congelación a -80°C.
- Volúmenes plasmáticos más altos mejoraron la detección de mutaciones en el ADN ev, pero no en el ADN cf.
Conclusiones:
- Los flujos de trabajo estandarizados y el procesamiento rápido son esenciales para la detección confiable de mutaciones en aplicaciones clínicas de biopsia líquida.
- evDNA puede ofrecer ventajas sobre cfDNA en escenarios preanalíticos difíciles.
- La optimización de los pasos preanalíticos es fundamental para maximizar la utilidad clínica de las biopsias líquidas.
Palabras clave:
ADN libre de células (cfADN)PCR de gotas digitales (ddPCR) es una técnicaADN extracelular derivado de las vesículas (ADNev)La biopsia de líquido es una biopsia de líquido.Los biomarcadores plasmáticos también son biomarcadores plasmáticos.Las variables preanalíticas son las variables preanalíticas.
