Un kit de herramientas para la ingeniería transcripcional programable en todos los reinos eucariotas

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular
• Biología Sintética
• Genética

Sus antecedentes:

• Los reguladores de la cromatina (CR) son cruciales para la vida eucariota, ya que modulan los estados de la cromatina.
• Las funciones de la mayoría de los CR predichos siguen sin ser caracterizadas experimentalmente.
• Existe la necesidad de herramientas para controlar con precisión la expresión génica en eucariotas.

Objetivo del estudio:

• Construir y probar una biblioteca de más de 300 reguladores de la cromatina (CR) de longitud completa para su capacidad de modular la transcripción génica.
• Identificar CR con funcionalidad interreino y evaluar su rendimiento en comparación con las herramientas existentes.
• Desarrollar nuevas herramientas basadas en CRISPR para la regulación génica programable.

Principales métodos:

• Creación de una biblioteca de más de 300 CR humanos, de plantas, levaduras, protozoos y virus fusionados a dominios de unión al ADN.
• Prueba de CR para la represión y activación transcripcional en células de plantas y humanas.
• Utilización de pantallas CRISPR agrupadas para identificar represores para la titulación de la expresión génica.

Principales resultados:

• Descubrimiento de CR que exhiben funcionalidad interreino, superando a las herramientas existentes para el control transcripcional en plantas y células humanas.
• Desarrollo de represores CRISPR capaces de titular la expresión génica a niveles intermedios.
• Identificación de RCOR1 y MTA2 como represores eucariotas universales activos en plantas, levaduras y células humanas.

Conclusiones:

• El kit de herramientas CR desarrollado avanza significativamente la ingeniería eucariota sintética.
• El estudio amplía la comprensión de la funcionalidad de los reguladores de la cromatina en diversas especies eucariotas.
• RCOR1 y MTA2 representan represores conservados y potentes con aplicabilidad eucariota general.