Un modelo de ratón viable RIPK3 D143N inactivo de la quinasa revela su función de andamio en la conducción del...

Área de la Ciencia:

• Biología celular Biología celular.
• Inmunología Inmunología.
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• La proteína quinasa 3 que interactúa con los receptores (RIPK3) regula la necroptosis, una forma de muerte celular programada.
• Los roles distintos de las funciones dependientes y independientes de la cinasa de RIPK3 en la enfermedad no se comprenden completamente.
• Los modelos RIPK3 inactivos de quinasa existentes exhiben letalidad embrionaria, lo que limita su utilidad.

Objetivo del estudio:

• Para generar y caracterizar un modelo de ratón RIPK3 (Ripk3^D143N/D143N) novedoso, viable e inactivo para la cinasa.
• Para diseccionar las funciones dependientes y independientes de la quinasa de RIPK3 en la muerte celular y las enfermedades inflamatorias.
• Para explorar el potencial terapéutico de dirigirse a la función de andamio de RIPK3.

Principales métodos:

• Generación y caracterización de Ripk3^D143N/D143N en ratones knock-in sin kinasa.
• Evaluación de la inducción de la necróptosis por varios estímulos.
• Evaluación del rescate de letalidad embrionaria en ratones con deficiencia de caspasa-8.
• Análisis de la protección contra la enfermedad inflamatoria impulsada por el TNF.
• Investigación del papel de RIPK3 en la activación de la vía de señalización JAK-STAT1.
• Inhibición farmacológica de JAK1/2 para evaluar la patogénesis de la enfermedad.

Principales resultados:

• Los ratones Ripk3^D143N/D143N son viables y fértiles, lo que indica que la actividad de la quinasa RIPK3 es indispensable para el desarrollo.
• La mutación D143N bloquea la necroptosis y rescata la letalidad embrionaria en ratones con deficiencia de caspase-8.
• Los ratones Ripk3^D143N/D143N muestran una protección reducida contra las enfermedades inflamatorias en comparación con los ratones con deficiencia de RIPK3, destacando un papel independiente de la quinasa.
• La función de andamio de RIPK3 promueve la inflamación y el daño tisular a través de la activación de JAK-STAT1.
• La inhibición de JAK1/2 reduce efectivamente la patogénesis de la enfermedad en este modelo.

Conclusiones:

• El ratón Ripk3^D143N/D143N es un modelo valioso para distinguir las funciones de quinasa y andamio de RIPK3.
• RIPK3 posee una función crítica de andamio independiente de la quinasa que impulsa la inflamación y el daño tisular.
• Dirigirse a la función del andamio de RIPK3, potencialmente a través de la inhibición de JAK-STAT1, ofrece una estrategia terapéutica para las enfermedades inflamatorias.