Correlatos conductuales y transcriptómicos prefrontales selectivos de la exposición aguda a clozapina en ratones...

La clozapina es un antipsicótico eficaz para la esquizofrenia resistente al tratamiento, pero las respuestas moleculares agudas a la clozapina aún no se han caracterizado completamente. La cría en aislamiento social produce anomalías conductuales relevantes para la esquizofrenia y permite la evaluación conjunta del alojamiento y la exposición a fármacos.

Para caracterizar las correlaciones conductuales y transcriptómicas prefrontales de un desafío agudo con clozapina en ratones aislados socialmente, reevaluar previamente priorizadoAnk3yNrxn1, y proporcionar hipótesis de contexto celular externo para los genes candidatos.

Se evaluaron ratones macho C57BL/6J en un diseño de cuatro grupos basado en el alojamiento y el fármaco, utilizando las pruebas de campo abierto, de reconocimiento de objetos novedosos y de inhibición prepulso. Para una auditoría reproducible de todo el transcriptoma, se recuantificaron 11 bibliotecas de la corteza prefrontal disponibles públicamente mediante un modelo factorial DESeq2 con control de la tasa de falsos descubrimientos. La priorización comparativa histórica, el análisis de redes, el cribado mediante aprendizaje automático y las simulaciones de acoplamiento molecular y dinámica molecular se trataron como análisis exploratorios. Se utilizaron datos de RNA-seq de célula única de la corteza prefrontal de adultos de tipo silvestre para la localización celular, el análisis CellChat y el knockout virtual, mientras que se utilizó una referencia cortical embrionaria por separado para la perturbación de factores de transcripción con CellOracle.

La clozapina aguda mostró su efecto conductual más claro sobre la hiperlocomoción asociada al aislamiento, mientras que la memoria de reconocimiento no mejoró y los resultados de la inhibición por prepulso variaron según la intensidad del estímulo. El análisis principal con DESeq2 identificó 56 genes con interacción entre alojamiento y fármaco con una FDR <0,05;Lamb2fue la señal transcriptómica más fuerte respaldada por FDR.Nrxn1mostraron cambios direccionalmente opuestos en los contrastes históricos por pares, pero no alcanzaron significancia FDR en el modelo factorial, mientras queAnk3no mostró apoyo factorial correspondiente. En datos de células individuales del cortex prefrontal adulto,Lamb2se concentró en células endoteliales, mientras queAnk3yNrxn1fueron ampliamente detectados en poblaciones neuronales. VirtualAnk3yNrxn1los perfiles de eliminación contenían 16 y 15 genes no diana significativos, respectivamente, con cinco genes compartidos y ningún efecto candidato recíproco significativo. Los análisis de CellOracle en células embrionarias identificaron una sensibilidad modelo-dependiente a factores de transcripción upstreamAnk3yNrxn1.

Estos hallazgos definen correlatos conductuales y transcriptómicos prefrontales selectivos de un desafío agudo con clozapina, en lugar de una recuperación conductual generalizada o una predicción de respuesta al tratamiento clínico.Lamb2fue la señal respaldada por FDR más fuerte en el modelo principal, mientras queAnk3yNrxn1siguen siendo candidatos computacionales exploratorios. Los análisis externos de célula individual y de perturbación virtual proporcionan hipótesis reguladoras y celulares comprobables, no evidencia de unión directa, regulación causal o efectos inducidos por la clozapinain vivo.