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PSMC2 promueve la progresión del carcinoma de vesícula biliar mediante la regulación del eje de señalización
Yiming Feng1, Qin Yang1, Lei Zhao1
1Cancer Center, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University, Wuhan 430023, China.
Abstract:
El cáncer de vesícula biliar (CVB) es una neoplasia maligna prevalente y agresiva del sistema biliar. Diversos estudios han revelado que la subunidad ATPasa 2 del proteasoma 26S (PSMC2) se encuentra sobreexpresada y asociada al proceso de desarrollo de varios tipos de cáncer. Sin embargo, su función específica en el CVB sigue siendo desconocida. El objetivo de este estudio es explorar la asociación entre PSMC2 y la patogénesis del CVB. Evaluamos la expresión de PSMC2 en muestras de pacientes con CVB y muestras normales. Mediante el uso del kit de recuento celular 8 (CCK-8) y ensayos de formación de colonias, de herida (scratch) y de migración en Transwell, investigamos los efectos de PSMC2 sobre la proliferación y migración de las células de CVB. Posteriormente, a través de análisis bioinformáticos, identificamos las vías del ciclo celular relacionadas con PSMC2 en las células de CVB. Mediante citometría de flujo, determinamos que el silenciamiento de PSMC2 podía alterar el ciclo celular en las células de CVB. Después, a través de análisis bioinformáticos y ensayos de Western blot, descubrimos la relación entre la vía AKT/Ciclina D1/CDK6 y el ciclo celular, y utilizamos un inhibidor de la RAC-alfa serina/treonina-protein quinasa (AKT) y un inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina 6 (CDK6) para revertir la proliferación de las células de CVB inducida por la sobreexpresión de PSMC2, con el fin de detectar el mecanismo de la función de PSMC2 en el CVB. Encontramos que PSMC2 estaba notablemente regulada al alza en las muestras de pacientes con CVB. Los experimentos in vitro demostraron que el silenciamiento de PSMC2 suprimió significativamente las capacidades de proliferación y migración de las células de CVB. Los análisis bioinformáticos mostraron un enriquecimiento significativo de la vía del ciclo celular tanto en la base de datos GO como en la de KEGG. Además, los genes relacionados con el ciclo celular CDK6 y Ciclina D1 estuvieron significativamente regulados al alza en los grupos con alta expresión de PSMC2. Posteriormente, identificamos que el silenciamiento de PSMC2 podía suprimir la activación de AKT y reducir la expresión de la Ciclina D1 y de CDK6. Asimismo, el tratamiento con el inhibidor de AKT pudo revertir la expresión aumentada de CDK6 tras la sobreexpresión de PSMC2, y el tratamiento con el inhibidor de CDK6 revirtió la progresión y alteró la distribución del ciclo celular en las células de CVB inducidas por la sobreexpresión de PSMC2. PSMC2 estuvo significativamente regulada al alza en los tejidos y líneas celulares de CVB. La expresión de PSMC2 promueve la progresión y la migración en las células de CVB, potencialmente mediante la regulación de la vía de señalización AKT/Ciclina D1/CDK6.
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