Aislamiento y caracterización de un gen de insulina de rata clonado

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• Los genes de insulina I y II en ratas no son alelicos y están separados por al menos 7 kb.
• Mientras que las regiones de codificación muestran homología, las secuencias de flanqueo difieren.
• La ubicación del gen de la insulina I varía entre las cepas de ratas en función de los fragmentos de Eco RI.

Objetivo del estudio:

• Para determinar la secuencia de nucleótidos del gen de insulina I de rata y las regiones adyacentes.
• Para confirmar la secuencia proteica de la pre-proinsulina I. en ratas.
• Para identificar elementos reguladores como promotores y sitios de poliadenilación.

Principales métodos:

• Sistema de clonación Lambda para aislar el fragmento Eco RI de 9.4 kb del ADN de la rata encapuchada.
• Secuenciación de nucleótidos del gen aislado y del ADN adyacente.
• Comparación de secuencias con clones de ADNc de insulina de rata.

Principales resultados:

• La región codificante del gen de insulina I de rata carece de secuencias intermedias.
• Una presunta secuencia intermedia de 119 bp está localizada en la región 5' no traducida.
• Se identificó una secuencia de promotor potencial (TATAAAGC) y un sitio de poliadenilación.

Conclusiones:

• La secuencia de nucleótidos determinada confirma la secuencia de proteínas pre-proinsulina I de la rata.
• El gen de insulina I de rata contiene elementos reguladores característicos de los genes eucariotas.
• El análisis estructural proporciona información sobre la regulación y evolución del gen de la insulina.