El aumento de la afluencia de iones de sodio es necesario para iniciar la proliferación de hepatocitos de rata

Área de la Ciencia:

• Hepatología Hepatología.
• Biología celular Biología celular.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• Los hepatocitos de rata adulta en cultivo primario proliferan en respuesta a factores de crecimiento específicos.
• La cinética de la proliferación de los hepatocitos in vitro imita los procesos de regeneración hepática in vivo.
• La afluencia de sodio (Na+) juega un papel crítico en la regulación de la proliferación celular.

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel de la afluencia de Na+ en la mediación de la proliferación de hepatocitos estimulada por factores de crecimiento.
• Para dilucidar la secuencia temporal de los eventos celulares durante el intervalo prereplicativo del crecimiento de los hepatocitos.
• Para determinar los efectos de la amilorida y otros moduladores de flujo catiónico en la proliferación de hepatocitos.

Principales métodos:

• Cultivo primario de hepatocitos de rata adulta en un medio libre de suero.
• Estimulación de la proliferación utilizando insulina, glucagón y el factor de crecimiento epidérmico (EGF).
• Estudios de inhibición con el uso de amilorida, ouabaína, monensina, nigericina, furosemida y tetrodotoxina.
• Medición de la afluencia de 22Na+, el transporte de aminoácidos y la incorporación de uridina y leucina radiomarcadas.

Principales resultados:

• Los medios libres de suero con insulina, glucagón y EGF estimulan la proliferación de los hepatocitos.
• La amilorida (un inhibidor de la afluencia de Na+) bloqueó reversiblemente la proliferación in vitro e in vivo.
• Otros moduladores de flujo catiónico como la ouabaína, la monensina y la nigericina también inhiben la proliferación.
• El FEAG estimuló preferentemente las respuestas tempranas (0-3 horas), seguidas de insulina y glucagón (3-12 horas), coincidiendo con los períodos sensibles a la amilorida.
• La amilorida inhibió la afluencia de Na+, el transporte de aminoácidos y la síntesis de ácido nucleico/proteína durante el intervalo pre-replicativo.

Conclusiones:

• La iniciación del crecimiento hepático requiere al menos dos procesos ordenados: la activación del flujo de Na+ por péptidos similares al EGF, seguida de la potenciación de eventos posteriores por insulina y glucagón.
• La afluencia de Na + sensible a la amilorida es un evento temprano crítico para iniciar la proliferación de los hepatocitos.
• Los hallazgos proporcionan información sobre los mecanismos moleculares subyacentes a la regeneración hepática.