El estrés de torsión promueve la sensibilidad de la DNAasa I de los genes activos

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La epigenética es la epigenética.
• Estructura de la cromatina La estructura de la cromatina

Sus antecedentes:

• Los genes activos exhiben estructuras únicas de cromatina con mayor sensibilidad a la digestión de la DNAasa I.
• Esta sensibilidad es crucial para la accesibilidad y regulación de los genes.

Objetivo del estudio:

• Investigar el papel del superenrollamiento del ADN y la topoisomerasa II en el mantenimiento de la sensibilidad de la DNAasa I de los genes activos.
• Para determinar si la inhibición de la topoisomerasa II altera la conformación del gen activo in vivo.

Principales métodos:

• Los glóbulos rojos de pollo fueron tratados con novobiocina, un inhibidor de la topoisomerasa II.
• Los ensayos de sensibilidad a la DNAasa I se realizaron en células tratadas y células de control.
• Los experimentos in vitro utilizaron nucleasa estafilocócica para inducir la escisión del ADN.

Principales resultados:

• El tratamiento con novobiocina invirtió rápidamente la sensibilidad preferencial a la DNAasa I de los genes activos de beta-globina in vivo.
• Los experimentos de control confirmaron la inhibición de la topoisomerasa II como la causa de este cambio de conformación.
• La escisión parcial del ADN in vitro imitaba la reversión de la sensibilidad de la DNAasa I.

Conclusiones:

• El superenrolamiento continuo del ADN, facilitado por la topoisomerasa II, es esencial para mantener la estructura abierta y sensible a la DNAasa I de la cromatina activa.
• En ausencia de tensión superhélica, la cromatina activa vuelve a un estado menos sensible.