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Chromosome Structure02:40

Chromosome Structure

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A functional eukaryotic chromosome must contain three elements: a centromere, telomeres, and numerous origins of replication.
The centromere is a DNA sequence that links sister chromatids. This is also where kinetochores, protein complexes to which spindle microtubules attach, are constructed after the chromosome is replicated. The kinetochores allow the spindle microtubules to move the chromosomes within the cell during cell division.
Telomeres consist of non-coding repetitive nucleotide...
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Homologous Recombination02:31

Homologous Recombination

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The basic reaction of homologous recombination (HR) involves two chromatids that contain DNA sequences sharing a significant stretch of identity. One of these sequences uses a strand from another as a template to synthesize DNA in an enzyme-catalyzed reaction. The final product is a novel amalgamation of the two substrates. To ensure an accurate recombination of sequences, HR is restricted to the S and G2 phases of the cell cycle. At these stages, the DNA has been replicated already and the...
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Restarting Stalled Replication Forks02:37

Restarting Stalled Replication Forks

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DNA replication is initiated at sites containing predefined DNA sequences known as origins of replication. DNA is unwound at these sites by the minichromosome maintenance (MCM) helicase and other factors such as Cdc45 and the associated GINS complex.The unwound single strands are protected by replication protein A (RPA) until DNA polymerase starts synthesizing DNA at the 5’ end of the strand in the same direction as the replication fork. To prevent the replication fork from falling apart,...
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Gene Conversion02:08

Gene Conversion

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Other than maintaining genome stability via DNA repair, homologous recombination plays an important role in diversifying the genome. In fact, the recombination of sequences forms the molecular basis of genomic evolution. Random and non-random permutations of genomic sequences create a library of new amalgamated sequences. These newly formed genomes can determine the fitness and survival of cells. In bacteria, homologous and non-homologous types of recombination lead to the evolution of new...
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Conservative Site-specific Recombination and Phase Variation02:53

Conservative Site-specific Recombination and Phase Variation

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Because the DNA segments are cut and reorganized in a direction-specific manner, site-specific recombination has emerged as an efficient genetic engineering technique. Flippase and Cyclization recombinases or Flp and Cre, respectively, are two members of the tyrosine recombinase family derived from bacteriophages, that are used to mediate site-specific DNA insertions, deletions, and targeted expression of proteins in mammalian cell lines.
The recognition sites for Cre recombinase called LoxP...
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Crossing Over01:30

Crossing Over

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Crossing over is the exchange of genetic information between homologous chromosomes during prophase I of meiosis I. Genetic recombination gives rise to allelic diversity in the newly formed daughter cells. In humans, crossing over produces genetically distinct haploid egg and sperm cells that undergo fertilization to produce unique offspring. Before cell division starts, the germ cell’s chromosome(s) undergo duplication in the S phase of the cell cycle. As the cells enter prophase I,...
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Determinantes de la direccionalidad en la recombinación lambda específica del sitio.

W Bushman, S Yin, L L Thio

    Cell
    |December 1, 1984
    PubMed
    Resumen
    Este resumen es generado por máquina.

    Las características estructurales del ADN dictan la direccionalidad en la recombinación específica del sitio lambda. La proteína Xis es la proteína Xis.

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    Área de la Ciencia:

    • Biología Molecular Biología Molecular
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    • La bioquímica es la bioquímica.

    Sus antecedentes:

    • La recombinación específica del sitio lambda es un proceso crucial para la integración y escisión del genoma viral.
    • La direccionalidad de esta recombinación está influenciada por secuencias específicas de ADN dentro del sitio de adhesión del fago.
    • Se ha observado el papel de la proteína Xis en la modulación de la integración y la escisión, pero no se ha aclarado completamente a nivel molecular.

    Objetivo del estudio:

    • Identificar y caracterizar las características estructurales del ADN responsables de la direccionalidad en la recombinación específica del sitio lambda.
    • Aclarar el mecanismo por el cual la proteína Xis afecta diferencialmente las reacciones de integración y escisión.
    • Investigar las características de unión de la proteína Xis y su impacto en la unión a la proteína Int.

    Principales métodos:

    • Pruebas de huella de ADN para identificar sitios de unión de proteínas reguladoras.
    • Mutagénesis dirigida al sitio para alterar secuencias específicas de ADN dentro del sitio de adhesión.
    • Electroforesis en gel y ensayos cuantitativos de unión para medir las interacciones proteína-ADN.
    • Análisis de productos de recombinación para determinar los efectos de las alteraciones de secuencia y la unión a proteínas.

    Principales resultados:

    • Las características estructurales clave del ADN que rigen la direccionalidad de la recombinación se encuentran a más de 70 bp a la izquierda y 40 bp a la derecha de la región de cruce.
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    • El estudio identifica regiones específicas del ADN y su disposición espacial como determinantes críticos de la direccionalidad en la recombinación lambda.
    • Los diferentes efectos de la proteína Xis en la integración y la escisión se explican por su interacción con distintos arreglos de secuencia.
    • La proteína Xis actúa como un potente modulador de la unión a Int a través de la unión cooperativa al ADN y los cambios conformacionales, controlando así la direccionalidad de la recombinación.