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Múltiples secuencias relacionadas con la actina en el genoma de Drosophila melanogaster
Cell
|January 1, 1980
Resumen
Los investigadores aislaron y caracterizaron un fragmento de ADN de Drosophila melanogaster que contiene secuencias complementarias al ARN mensajero de actina. Este fragmento, K1, ayudó a identificar a múltiples miembros de la familia de genes de actina dentro del genoma de la mosca de la fruta.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- Genética La genética.
- Biología del desarrollo Biología del desarrollo.
Sus antecedentes:
- Las proteínas de actina son componentes esenciales del citoesqueleto conservados en todos los eucariotas.
- Comprender las familias de genes de actina proporciona información sobre la estructura y la función celular.
Objetivo del estudio:
- Para aislar y caracterizar un fragmento de ADN de Drosophila melanogaster que codifica la actina.
- Para investigar la organización y la ubicación genómica de los genes de actina en Drosophila melanogaster.
Principales métodos:
- Aislamiento y caracterización de un fragmento de 7,2 kb de ADN (K1) de Drosophila melanogaster.
- La hibridación mediante el uso de un plásmido de ADNc de actina de Dictyostelium (B1) como sonda.
- Traducción in vitro de ARNm seleccionado, electroforesis en gel bidimensional y ensayos de unión a la agarosa de la DNAasa I.
- Mapeo físico de los sitios de la endonucleasa de restricción y la dirección de transcripción.
- La hibridación in situ para localizar el locus cromosómico del fragmento K1.
Principales resultados:
- Se identificó un fragmento de ADN de 7.2 kb (K1) que contiene secuencias complementarias al ARNm de actina de Drosophila melanogaster.
- Productos de traducción in vitro co-migrados con las conocidas actinas de Drosophila melanogaster y la DNAasa I. ligada.
- Localizaron la región de codificación de K1 y determinaron la dirección de la transcripción.
- Los estudios de hibridación indicaron que la presunta región de codificación de K1 etiqueta fragmentos de restricción múltiple del ADN embrionario de Drosophila melanogaster.
- Mapeó el locus K1 a dos bandas estrechamente relacionadas (88F) e identificó secuencias de ADN relacionadas que corresponden a genes putativos de actina.
Conclusiones:
- El fragmento de ADN aislado K1 contiene secuencias que codifican Drosophila melanogaster actin.
- La secuencia de nucleótidos de la presunta región codificante de K1 es responsable del patrón de fragmento de restricción múltiple observado.
- Los genes de la actina en Drosophila melanogaster son probablemente miembros de una familia de genes estrechamente relacionados.
- La cartografía citológica reveló la ubicación de K1 y otras secuencias de actina relacionadas.