Secuencias de ADN de poliomas implicadas en el control de la expresión génica viral en las células de carcinoma...

Área de la Ciencia:

• Virología Virología.
• Biología del desarrollo Biología del desarrollo.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• El virus del polioma se replica en las células diferenciadas del ratón, pero no en las células no diferenciadas del carcinoma embrionario (CE).
• Las células EC se vuelven permisivas para el virus del polioma tras la diferenciación.

Objetivo del estudio:

• Aislar y caracterizar mutantes del virus del polioma capaces de replicarse en células EC indiferenciadas.
• Para investigar la base genética de la permisividad de la célula huésped del virus del polioma relacionada con la diferenciación.

Principales métodos:

• Aislamiento de mutantes del virus del polioma (Py EC) utilizando líneas celulares EC (PCC4-Aza y F9).
• Análisis de la estructura del genoma viral utilizando el análisis de fragmentos de restricción HpaII-3.
• Secuenciación de ADN de genomas virales mutantes.

Principales resultados:

• Se aisló una nueva clase de mutantes del virus del polioma (Py EC), capaz de replicarse en las células PCC4-Aza EC.
• Estos mutantes no crecieron en las células F9 EC, que están bloqueadas en la diferenciación.
• Los genomas Py EC tenían 20-50 bases adicionales en el fragmento de restricción HpaII-3 en comparación con la cepa parental.
• Se identificaron mutantes de poliomas capaces de crecer en células F9 EC, con cambios de secuencia en una región que forma una estructura similar al ARNt putativo.

Conclusiones:

• Las mutaciones identificadas en el virus del polioma están asociadas con la capacidad de replicarse en células EC indiferenciadas.
• La región mutada puede desempeñar un papel en la regulación de la transcripción viral temprana en respuesta al estado de diferenciación de la célula huésped.