La expresión génica SV40 está modulada por la unión cooperativa del antígeno T al ADN

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Virología Virología.
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• El virus simio 40 (SV40) es un sistema modelo para el estudio de la replicación y transcripción del ADN eucariota.
• El antígeno T grande SV40 (T-ag) es una proteína viral multifuncional esencial para la replicación viral y la expresión génica.

Objetivo del estudio:

• Para investigar las propiedades de unión al ADN del antígeno T grande SV40.
• Para dilucidar el mecanismo por el cual T-ag reprime la síntesis temprana de ARN SV40.
• Para definir la región promotora SV40 requerida para la iniciación de la transcripción.

Principales métodos:

• Análisis de la unión al ADN del antígeno T grande SV40 de tipo salvaje.
• Ensayos de transcripción in vitro utilizando plantillas de ADN SV40 de tipo salvaje, mutante e híbrido.
• Mapeo de la región promotora esencial para la transcripción temprana SV40.

Principales resultados:

• El antígeno T grande SV40 se une cooperativamente a tres sitios en tándem en la región reguladora SV40.
• La unión a T-ag reprime específicamente la síntesis temprana de ARN SV40 in vitro.
• Una región de 85 pares de bases, adyacente a un sitio de unión T-ag pero que carece de una secuencia TATA, es necesaria y suficiente para la iniciación de la transcripción.
• La represión ocurre en el paso de iniciación, no en el alargamiento, de la síntesis de ARN.

Conclusiones:

• La unión cooperativa de T-ag a sus sitios de ADN inhibe directamente el inicio de la síntesis temprana de ARN SV40.
• Se propone un modelo para el papel de T-ag en la regulación de la transcripción viral y la replicación del ADN durante la infección lítica SV40.