El ADN del virus del tumor mamario contiene secuencias requeridas para su transcripción regulada por hormonas

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Virología Virología.
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• Se sabe que los glucocorticoides regulan la transcripción de los genes integrados del virus del tumor mamario murino (MTV) en células de cultivo de tejido de hepatoma de rata (HTC).
• La ubicación precisa de los elementos reguladores que median este control hormonal, ya sea en el ADN celular adyacente o dentro del genoma viral, no quedó clara.

Objetivo del estudio:

• Investigar si la regulación hormonal de la transcripción génica MTV se origina en secuencias celulares adyacentes o dentro del ADN viral.
• Para determinar el papel del sitio de integración del huésped en la expresión génica MTV mediada por glucocorticoides.

Principales métodos:

• Análisis de las tasas de transcripción relativas de MTV y secuencias adyacentes de HTC en dos líneas celulares de HTC infectadas por MTV (J2.15 y J2.17) con una sola inserción de ADN MTV.
• Medición de las tasas de transcripción en células HTC no infectadas utilizando secuencias equivalentes que carecen de ADN MTV.
• Experimentos de marcado de pulso de ARN para cuantificar las tasas de transcripción génica de MTV.
• Mapeo de transcripción para determinar el extremo 5' del ARN MTV nuclear.

Principales resultados:

• Los glucocorticoides estimulan la transcripción del gen MTV en las células J2.17 pero no en las células J2.15.
• No se detectó transcripción de secuencias celulares flanqueantes en células infectadas o no infectadas.
• La síntesis de ARN MTV en las células J2.17 no se debe a la transcripción de lectura a través de un promotor celular.
• El mapeo de transcripciones reveló que el extremo 5' del ARN MTV se encuentra dentro del ADN proviral.

Conclusiones:

• El sitio anfitrión de la integración MTV no necesita ser transcripcionalmente activo o hormonalmente sensible para la expresión génica viral.
• La síntesis de ARN MTV inducida por glucocorticoides está mediada por un elemento de respuesta hormonal ubicado dentro del ADN proviral, no flanqueando las secuencias celulares.
• Estos hallazgos indican que el virus integrado del tumor mamario murino contiene sus propios elementos reguladores para la respuesta a los glucocorticoides.