Aislamiento de secuencias oncogénicas humanas (homólogo v-fes) de una biblioteca cosmida

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La oncogenómica es la oncogenómica.
• Virología Virología.

Sus antecedentes:

• El virus del sarcoma felino (FeSV) contiene secuencias transformadoras (gen v-fes) comunes a los aislados de Gardner (GA) y Snyder Theilen (ST).
• Comprender el homólogo humano de los oncogenes virales es crucial para la investigación del cáncer.

Objetivo del estudio:

• Para identificar y caracterizar el homólogo humano (s) del gen v-fes encontrado en FeSV.
• Para determinar si el homólogo humano v-fes posee actividad transformadora.

Principales métodos:

• Construcción de una biblioteca de ADN de carcinoma de pulmón humano en un sistema de vectores cósmidos.
• Aislamiento y caracterización de clones cósmidos que contienen secuencias homólogas GA/ST FeSV v-fes.
• Análisis de la homología de secuencia y la colinealidad, incluyendo la identificación de intrones potenciales.
• Transfección de secuencias humanas c-fes aisladas en células RAT-2 utilizando un sistema de selección de la timidina quinasa.

Principales resultados:

• Se aislaron tres clones cósmidos, que contenían aproximadamente 56 kilobases de ADN humano contiguo con secuencias GA/ST FeSV v-fes homólogas.
• Las secuencias homólogas se distribuyeron discontinuamente en una región de 9,5 kilobases, lo que indica la presencia de al menos tres intrones.
• La transfección de la secuencia c-fes humana en células RAT-2 no demostró actividad de transformación detectable.

Conclusiones:

• El genoma humano contiene secuencias homólogas al gen FeSV v-fes.
• La secuencia c-fes humana identificada carece del potencial de transformación observado en el gen v-fes viral.
• Esto sugiere que el homólogo humano puede funcionar de manera diferente o requerir factores adicionales para la transformación oncogénica.