Las transcripciones tardías de T4 se inician cerca de una secuencia de ADN conservada

Área de la Ciencia:

• Microbiología Microbiología.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• La transcripción tardía de los bacteriófagos T4 es compleja y difiere de los sistemas procariotas típicos.
• Requiere la ARN polimerasa del huésped, proteínas T4 específicas (genes 33, 45, 55) y polipéptidos no identificados.
• La competencia de la plantilla de ADN, que involucra 5-hidroximetil citosina y replicación, es esencial para la transcripción tardía.

Objetivo del estudio:

• Mapear los sitios de iniciación de los ARN mensajeros (ARNm) para cuatro genes tardíos T4 de los bacteriófagos (21, 22, 23, 36) in vivo.
• Para determinar las secuencias de ADN en estos sitios de iniciación.
• Para investigar el papel de la replicación del ADN en la transcripción tardía.

Principales métodos:

• Se empleó el mapeo de la nucleasa S1 para localizar los sitios de iniciación del ARNm.
• Se realizó la secuenciación del ADN en los sitios de iniciación identificados.
• Se realizó un análisis de la síntesis de ARNm del gen 23 en un mutante con deficiencia de replicación del ADN (genes 30 y 46).

Principales resultados:

• Se mapearon los sitios de iniciación para los ARNm tardíos T4 de los genes 21, 22, 23 y 36.
• Se identificó una secuencia de ADN conservada, TATAAATACTATT, aguas arriba de los extremos 5' de los ARNm tardíos.
• El gen 23 ARNm sintetizado en ausencia de replicación del ADN fue idéntico a la transcripción tardía normal.

Conclusiones:

• La secuencia conservada TATAAATACTATT es probablemente reconocida por la maquinaria de transcripción para la expresión génica tardía del bacteriófago T4.
• La transcripción tardía puede iniciarse independientemente de la replicación del ADN bajo condiciones específicas de mutantes.
• Estos hallazgos aclaran los elementos reguladores clave de la expresión génica viral compleja.