Mantenimiento del plásmido multicopia Clo DF13 en células de E. coli: evidencia de recombinación específica del sitio...

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• Microbiología Microbiología.

Sus antecedentes:

• Los mutantes de control de copias del plásmido Clo DF13 exhiben una herencia inestable en E. coli.
• Estos plásmidos inestables son a menudo moléculas de ADN multiméricas que carecen de la región parB.

Objetivo del estudio:

• Para determinar la secuencia de nucleótidos de la región parB.
• Para dilucidar el mecanismo de estabilidad del plásmido mediado por parB.

Principales métodos:

• Secuenciación de nucleótidos de la región parB.
• Análisis genético de la función de parB y su interacción con el gen L.
• Investigación de la resolución multimérica del plásmido.

Principales resultados:

• La región parB es una secuencia no codificante de 328 bp con simetría interna.
• parB media una resolución site-specific independiente de la recA de los sitios del ADN intramolecular.
• La transcripción del operón L del gen adyacente al parB es necesaria para su función.
• La supresión de los impactos parB de los derivados Clo DF13 wt y cop de manera diferente.

Conclusiones:

• La región parB asegura una herencia estable de los derivados de cobre de Clo DF13 mediante la resolución de moléculas de ADN multimérico.
• Dos sistemas de recombinación distintos, dependientes de parB y independientes de parB, probablemente contribuyen al mantenimiento del plásmido Clo DF13.