Excisión específica del sitio del ADN del polioma integrado

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Virología Virología.
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• Las células Cyp son células murinas con un genoma de virus de polioma térmicamente sensible.
• El genoma viral se integra a 39°C y se extirpa/replica a 33°C.

Objetivo del estudio:

• Para investigar el mecanismo de escisión precisa del ADN en subclones raros de células Cyp.
• Identificar las secuencias celulares y virales involucradas en la generación de moléculas quiméricas (Rm I).

Principales métodos:

• Análisis de secuencias de ADN en el sitio de cruce en moléculas quiméricas.
• Comparación de secuencias de ADN viral y celular que flanquean la unión de integración.

Principales resultados:

• El cambio de temperatura hacia abajo induce la escisión y la circularización de segmentos específicos de ADN en subclones raros de Cyp.
• El sitio de cruce exhibe una homología directa mínima (1-2 pares de bases).
• Extensivos parches de homología (19-20 pares de bases) y secuencias similares orientadas opuestamente (12-14 pares de bases) flanquean el sitio de cruce.

Conclusiones:

• Un mecanismo específico de recombinación media una exacta escisión del ADN viral.
• Las características de la secuencia de ADN observadas sugieren un nuevo mecanismo para la recombinación específica del sitio.