Activación de los principales genes de choque térmico de las drosófilas in vitro

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• Biología del desarrollo Biología del desarrollo.

Sus antecedentes:

• Los genes de choque térmico de Drosophila inactivos pueden ser activados por transcripción.
• Los factores citoplasmáticos de las células con shock térmico están implicados en este proceso de activación.

Objetivo del estudio:

• Investigar los mecanismos moleculares subyacentes a la activación del gen de choque térmico en Drosophila.
• Identificar y caracterizar los factores responsables de inducir la actividad transcripcional en los genes de choque térmico.

Principales métodos:

• Aislamiento de núcleos diploides de Drosophila.
• Incubación de núcleos con extractos citoplasmáticos de células con y sin choque térmico.
• Purificación parcial y caracterización del factor activo.
• Ensayos de transcripción in vitro con el uso de la ARN polimerasa de E. coli.
• Análisis de los cambios de la cromatina utilizando métodos microscópicos y bioquímicos.
• Experimentos de agotamiento de la histona H1.

Principales resultados:

• Los extractos citoplasmáticos de Drosophila con choque térmico indujeron la transcripción de genes de choque térmico (87A y 87C loci) en núcleos aislados.
• No se observó ningún efecto en la transcripción del gen de la histona.
• El factor de activación es sensible a la proteasa y térmico-lábil.
• Se produjo una alteración significativa de la cromatina 5' distal de los genes estructurales tras la activación in vitro.
• Este cambio de cromatina y la activación del gen ocurrieron independientemente de la actividad endógena de la ARN polimerasa II.
• La activación también se observó después de la depleción de la histona H1.

Conclusiones:

• Un factor citoplasmático inducible al calor juega un papel crucial en el inicio de la activación del gen de choque térmico.
• Los cambios observados en la cromatina pueden representar un evento temprano en la activación génica, que precede al reclutamiento de la ARN polimerasa II.
• La histona H1 no es esencial para este paso inicial de la activación del gen de choque térmico.