La citocalasina D no produce la despolimerización neta de los filamentos de actina en las células HEp-2

Área de la Ciencia:

• Biología celular Biología celular.
• La bioquímica es la bioquímica.
• Dinámica del citoesqueleto Dinámica del citoesqueleto

Sus antecedentes:

• Se sabe que el tratamiento con citocalasina altera la morfología celular y la organización del filamento de actina.
• El mecanismo detrás de estos cambios inducidos por la citocalasina, particularmente la despolimerización de la actina, ha sido objeto de debate.
• Estudios anteriores sugirieron que las citocalasinas despolimerizan la actina filamentosa (F-actina) en actina globular (G-actina), pero la evidencia sigue siendo concluyente.

Objetivo del estudio:

• Para investigar si la citocalasina D (CD) causa la despolimerización neta de los filamentos de actina en las células HEp-2.
• Aclarar el mecanismo por el cual las citocalasinas afectan a las estructuras celulares de actina.

Principales métodos:

• Tratamiento de filamentos de actina purificados con citocalasina B (CB) y evaluación de la viscosidad y microscopía electrónica.
• Análisis de la actividad de la ATP-asa de la F-actina durante el tratamiento con CB.
• Evaluación de la unión de la meromiosina pesada a las estructuras de actina en células tratadas con CD.
• Cuantificación de la G-actina y la F-actina en extractos celulares utilizando un ensayo de inhibición de la DNasa I.

Principales resultados:

• Los filamentos de actina purificados tratados con CB mostraron una disminución de la viscosidad y una morfología anormal, pero no una despolimerización a través del microscopio electrónico.
• El tratamiento con CB aumentó la actividad de la F-actina ATP-asa, lo que sugiere una desestabilización en lugar de una despolimerización.
• Los geles de actina disueltos por CB o CD no implicaron la despolimerización del filamento.
• Las células tratadas con CD retienen estructuras de actina filamentosa capaces de unirse a la meromiosina pesada.
• No se observó despolimerización neta de los filamentos de actina (F-actina a G-actina) en las células HEp-2 después de la exposición a corto o largo plazo a CD.

Conclusiones:

• La alteración de las estructuras celulares de actina inducida por la citocalasina no es el resultado de la despolimerización neta de los filamentos de actina.
• La desestabilización del filamento de actina y la organización alterada, en lugar de la despolimerización, probablemente subyacen a los efectos de la citocalasina.
• Los hallazgos desafían la hipótesis prevaleciente que atribuye los efectos de la citocalasina únicamente a la despolimerización de la actina.