Mutantes reguladores post-transcripcionales en un operón de la proteína ribosómica ARN polimerasa de E. coli

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética bacteriana Genética bacteriana.
• La biogénesis del ribosoma.

Sus antecedentes:

• Los plásmidos de alto número de copias que transportan elementos genéticos específicos pueden afectar negativamente el crecimiento del huésped bacteriano.
• El operón rplJ-rplL es esencial para la función del ribosoma bacteriano y la síntesis de la proteína ribosómica L10.

Objetivo del estudio:

• Investigar la base genética del deterioro del crecimiento causado por una construcción plasmática específica.
• Para identificar mutaciones que alivien los efectos perjudiciales del plásmido en el crecimiento bacteriano.
• Para aclarar los mecanismos reguladores que rigen la expresión génica rplJ a nivel de traducción.

Principales métodos:

• Aislamiento y caracterización de mutaciones espontáneas que confieren resistencia a la inhibición del crecimiento inducida por plásmidos.
• Secuenciación de nucleótidos de plásmidos mutados para identificar alteraciones genéticas.
• Análisis de la transcripción genética y la traducción del operón rplJ-rplL en cepas salvajes y mutantes.

Principales resultados:

• Se identificaron seis mutaciones puntuales independientes que eliminan el efecto perjudicial del plásmido.
• Todas las mutaciones se produjeron dentro de la región líder del operón rplJ, distante del promotor PJ.
• Los plásmidos mutantes mostraron una transcripción normal de rplJ-rplL, pero no pudieron traducir el ARN mensajero de rplJ en la proteína ribosomal L10.

Conclusiones:

• Las mutaciones identificadas definen una región reguladora dentro de la secuencia líder del operón rplJ.
• Esta región parece modular la eficiencia de traducción del ARN mensajero rplJ.
• Estos hallazgos sugieren un nuevo mecanismo para la regulación post-transcripcional de la síntesis de proteínas ribosómicas en bacterias.