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El complejo de quinasa activadora de Cdk es un componente del factor de transcripción humano TFIIH
R Shiekhattar1, F Mermelstein, R P Fisher
1Howard Hughes Medical Institute, Department of Biochemistry, Robert Wood Johnson Medical School, University of Medicine and Dentistry of New Jersey, Piscataway 08854-5635.
Nature
|March 16, 1995
Resumen
El factor de transcripción IIH (TFIIH) contiene el complejo Cdk-activating kinase (Cak), que incluye Cdk7 y ciclina H. Este complejo es crucial para la transcripción dependiente de TFIIH y la fosforilación del dominio carboxiterminal de la ARN polimerasa II.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- La bioquímica es la bioquímica.
- Biología celular Biología celular.
Sus antecedentes:
- El factor de transcripción IIH (TFIIH) posee actividad quinasa esencial para la fosforilación de la ARN polimerasa II (RNAPII) por el dominio carboxiterminal (CTD).
- La composición precisa y la función de la subunidad de quinasa de TFIIH estaban bajo investigación.
Objetivo del estudio:
- Para identificar el componente quinasa de TFIIH.
- Para aclarar el papel de esta quinasa en la transcripción dependiente de TFIIH y la fosforilación de CTD.
- Explorar conexiones potenciales entre la transcripción y la regulación del ciclo celular.
Principales métodos:
- Purificación extensiva del TFIIH mediante el uso de cromatografía.
- Pruebas de anticuerpos purificados por afinidad para inhibir la actividad de TFIIH y la fosforilación de CTD.
- Análisis de la composición y función del complejo Cdk-activating kinase (Cak).
- Ensayos de fosforilación utilizando péptidos CTD, Cdc2 y Cdk2.
Principales resultados:
- El complejo Cdk-activating kinase (Cak), compuesto por Cdk7 y ciclina H, fue identificado como un componente de TFIIH.
- Los anticuerpos contra la ciclina H y Cdk7 inhibieron la transcripción dependiente de TFIIH y la fosforilación de CTD.
- Cak existe en al menos dos complejos: TFIIH y un complejo más pequeño y distinto.
- Tanto los complejos de Cak como el Cak recombinante fosforilaban un péptido CTD.
- Se encontró que el TFIIH fosforila Cdc2 y Cdk2.
Conclusiones:
- El complejo de Cdk-activating kinase (Cak) es una parte integral de TFIIH, mediando la fosforilación de CTD.
- El TFIIH juega un papel en la regulación de la iniciación de la transcripción a través de su actividad quinasa.
- La fosforilación de Cdc2 y Cdk2 por TFIIH sugiere un vínculo funcional entre la transcripción y la progresión del ciclo celular.