Clonado y caracterización de una fosfoinositida-3 quinasa humana activada por una proteína G

Área de la Ciencia:

• Biología celular Biología celular.
• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• La actividad de la fosfoinositida-3 quinasa (PI3K) es crucial para las respuestas celulares mediadas por los receptores de superficie celular y la clasificación de proteínas en la levadura.
• Los PI3K son típicamente reclutados por los receptores de tirosina quinasa y consisten en subunidades adaptadoras p110 catalíticas y p85 con dominios de homología Src 2 (SH2).

Objetivo del estudio:

• Clonar y caracterizar un nuevo isotipo de fosfoinositida-3 quinasa, designado p110 gamma.
• Para investigar las propiedades de activación e interacción de la enzima p110 gamma.

Principales métodos:

• Clonado y caracterización del isotipo de la p110 gamma fosfoinositida-3 quinasa.
• En ensayos de activación in vitro se utilizan proteínas de unión al trifosfato de guanosina (GTP) heterotriméricas (proteínas G).
• Análisis de las interacciones proteína-proteína, específicamente con las moléculas adaptadoras p85.

Principales resultados:

• La enzima gamma p110 fue clonada y caracterizada con éxito.
• Los estudios in vitro demostraron la activación de p110 gamma por las subunidades alfa y beta gamma de las proteínas G heterotriméricas.
• Lo más importante es que p110 gamma no interactuó con la molécula del adaptador p85.
• Se identificó un potencial dominio de homología de pleckstrin cerca del extremo amino de p110 gamma.

Conclusiones:

• El isotipo gamma p110 representa una clase distinta de la fosfoinositida-3 quinasa.
• Esta enzima puede servir como un enlace molecular entre los receptores acoplados a proteínas G y la generación de segundos mensajeros de fosfoinosítidos fosforilados D-3.
• La vía gamma p110 ofrece un nuevo mecanismo para la señalización celular distinto de la activación clásica de PI3K dependiente de p85.