Análisis de una secuencia líder de 5' en el virus de la leucemia murina 21S ARN: mapeo heterodúplex con productos...

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Virología Virología.
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• El ARNm de la glicoproteína del retrovirus se sintetiza principalmente desde el extremo 3' del genoma viral.
• El origen preciso de las secuencias de mRNA de la glicoproteína del virus de la leucemia murina (MuLV) no estaba claro.

Objetivo del estudio:

• Investigar si el ARNm de la glicoproteína MuLV contiene secuencias de los extremos 5' y 3' del genoma viral.
• Para caracterizar el extremo 5' del ARNm de la glicoproteína MuLV.

Principales métodos:

• Los ensayos de hibridación utilizan una sonda 5 'específica derivada de una transcripción inversa unida al primer del tRNA.
• Análisis heterodúplex de ARN 21S con especies de ADN complementario largo (ADNc) sintetizadas a través de la transcriptasa inversa endógena.
• Microscopía electrónica para visualizar híbridos de ARN y ADN.

Principales resultados:

• Una sonda 5'-específica se hibridizó con ARN que contiene 21S poli(A), lo que indica la presencia de una secuencia líder de 5'.
• La microscopía electrónica de heterodúplexos reveló una secuencia líder de aproximadamente 500 nucleótidos en el extremo 5' del ARN 21S.
• Esta secuencia líder se asignó al extremo 5' del genoma viral, mientras que el resto del ARN 21S se originó en la porción 3'.

Conclusiones:

• El ARNm de la glicoproteína MuLV (21S ARN) posee una secuencia líder que se origina en el extremo 5' del genoma viral.
• La mayoría de las secuencias de ARNm de la glicoproteína MuLV se derivan del extremo 3' del genoma.
• La actinomicina D puede interferir con la transcripción inversa de las secuencias que forman el líder 5' en el ARN 21S.