La asociación de las subunidades de la quinasa activadora de Cdk con el factor de transcripción TFIIH

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.
• Biología celular Biología celular.

Sus antecedentes:

• El dominio carboxiterminal (CTD) de la subunidad grande de la ARN polimerasa II es crucial para regular el inicio de la transcripción.
• La fosforilación de la DTC ocurre in vivo y puede ser mediada por el factor de transcripción general TFIIH in vitro.
• El TFIIH de mamíferos posee actividades de CTD quinasa y helicasa.

Objetivo del estudio:

• Para identificar las subunidades específicas dentro del TFIIH de mamífero purificado responsable de su actividad quinasa.
• Investigar la relación funcional entre el TFIIH, la cinasa activadora de Cdk (Cak) y la fosforilación de CTD.

Principales métodos:

• Purificación de TFIIH de mamíferos extraído del hígado de rata.
• Análisis bioquímicos para evaluar las actividades de la cinasa CTD y la cinasa Cdk2 de los preparados TFIIH y Cak.
• Identificación de las subunidades del polipéptido TFIIH utilizando componentes conocidos de quinasa y ciclina.

Principales resultados:

• Se identificaron dos polipéptidos de TFIIH purificado de mamíferos como MO15/Cdk7 quinasa y ciclina H, las subunidades de la quinasa activadora de Cdk (Cak).
• Tanto los preparados TFIIH como Cak demostraron la capacidad de fosforilar las proteínas CTD recombinantes y Cdk2 recombinantes.
• Se confirmó la presencia de Cak dentro del TFIIH.

Conclusiones:

• El Cak es un componente integral del complejo del factor de transcripción II H (TFIIH) de los mamíferos.
• Este hallazgo sugiere un doble papel para Cak tanto en la regulación transcripcional como en el control del ciclo celular.
• Es probable que la actividad de la cinasa CTD del TFIIH esté mediada por su complejo Cak asociado.