Videos de Experimentos Relacionados
Observación directa de la actividad enzimática con el microscopio de fuerza atómica
M Radmacher1, M Fritz, H G Hansma
1Department of Physics, University of California, Santa Barbara 93106.
Science (New York, N.Y.)
|September 9, 1994
Resumen
La proteína lisozima sufre fluctuaciones de altura durante la hidrólisis, observadas a través de la microscopía de fuerza atómica. Estos cambios están relacionados con la interacción del sustrato y pueden indicar cambios de conformación en la enzima.
Área de la Ciencia:
- La biofísica es la biofísica.
- Enzimología Enzimología.
Sus antecedentes:
- La lisozima es una enzima clave en los sistemas biológicos.
- Comprender la dinámica enzimática es crucial para el desarrollo de fármacos.
Objetivo del estudio:
- Para investigar el comportamiento dinámico de la lisozima.
- Para correlacionar las fluctuaciones observadas con la actividad enzimática.
Principales métodos:
- Microscopía de fuerza atómica (AFM) en modo de tapping.
- Las mediciones realizadas en la lisozima adsorbida en la mica en líquido.
Principales resultados:
- Se observaron fluctuaciones de altura de 1 nm de ~50 ms de duración sobre las moléculas de lisozima.
- Las fluctuaciones disminuyeron significativamente en presencia de quitobiosa (inhibidor).
- La presencia de sustrato (oligoglucósido) indujo estas fluctuaciones.
Conclusiones:
- Las fluctuaciones de altura probablemente representan cambios en la conformación de la lisozima durante la hidrólisis.
- Una explicación alternativa involucra transientes variaciones complejas de altura/elasticidad.
- AFM proporciona información sobre las interacciones y la dinámica de la enzima y el sustrato.