El gen de reparación de escisión de levadura RAD2 codifica una endonucleasa de ADN de una sola cadena

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.
• La bioquímica es la bioquímica.

Sus antecedentes:

• La reparación por escisión de nucleótidos (NER) es crucial para reparar el daño del ADN causado por la radiación UV en los eucariotas.
• Los defectos en el NER conducen a la xeroderma pigmentosum (XP), un síndrome humano propenso al cáncer.
• El gen RAD2 en la levadura Saccharomyces cerevisiae es esencial para el NER y su proteína es homóloga a la XPG humana.

Objetivo del estudio:

• Para caracterizar bioquímicamente la proteína RAD2 de S. cerevisiae.
• Para investigar la actividad enzimática de la proteína RAD2 en la reparación del ADN.

Principales métodos:

• Sobreproducción y purificación de la proteína RAD2 de S. cerevisiae.
• Ensayos enzimáticos utilizando ADN circular de una y dos hebras en presencia de magnesio.

Principales resultados:

• La proteína RAD2 purificada exhibe actividad endonucleasa, degradando el ADN circular de una sola hebra.
• La actividad de la endonucleasa RAD2 es específica para el ADN monocatenario; no afecta al ADN de doble cadena.
• La proteína RAD2 es esencial para el paso de incisión en la reparación por escisión de la levadura.

Conclusiones:

• La proteína RAD2 y su homólogo humano, la proteína XPG, son componentes catalíticos que incisan las hebras de ADN dañadas durante la reparación por escisión.
• Es probable que los eucariotas utilicen dos actividades distintas de la endonucleasa para la doble incisión en los sitios de daño del ADN.