La fosforilación de tirosina de las proteínas de unión al ADN por múltiples citocinas

Área de la Ciencia:

• Inmunología Inmunología.
• Biología Molecular Biología Molecular
• La señalización celular de las células.

Sus antecedentes:

• El interferón-alfa (IFN-alfa) y el interferón-gamma (IFN-gamma) regulan la expresión génica a través de la fosforilación de la tirosina de los factores de transcripción, en particular el componente p91 del factor genético 3 (ISGF-3) estimulado por el interferón.
• Los complejos activados por interferón se unen a los potenciadores en los promotores de genes de respuesta temprana, como el gen Fc gamma Receptor I (Fc gamma RI).
• Comprender la regulación génica mediada por citoquinas es crucial para la modulación de la respuesta inmune.

Objetivo del estudio:

• Investigar si otras citoquinas, además de los interferones, pueden activar factores de transcripción que se unen a la región de respuesta IFN-gamma (GRR).
• Determinar el papel de la fosforilación de la tirosina y los componentes de proteínas específicas en la activación de genes inducida por citoquinas.
• Examinar el efecto de varias citocinas en la inducción de la expresión génica Fc gamma RI.

Principales métodos:

• Tratamiento de los monocitos o bazofilos de la sangre periférica humana con citoquinas específicas: IL-3, IL-5, IL-10, GM-CSF, IFN-gamma.
• Análisis de proteínas de unión al ADN que reconocen el GRR del promotor Fc gamma RI utilizando ensayos de desplazamiento de movilidad electroforética.
• Identificación de las proteínas fosforiladas por tirosina dentro de los complejos de unión al ADN activados a través de Western blotting o técnicas similares.

Principales resultados:

• La interleucina-3 (IL-3), IL-5, IL-10 y el factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF) activaron las proteínas de unión al ADN que reconocen el Fc gamma RI GRR.
• La fosforilación de tirosina fue esencial para el ensamblaje de estos complejos de unión a GRR.
• Complejos inducidos por IFN-gamma e IL-10 que contienen la proteína p91, lo que lleva a la inducción de ARN RI gamma de Fc.
• Los complejos activados por IL-3 y GM-CSF que contienen una proteína fosforilada por tirosina de 80 kDa, pero no indujeron el ARNRI gamma Fc.
• El pretratamiento de GM-CSF e IL-3 inhibió el ARN Fc gamma RI inducido por IFN-gamma.

Conclusiones:

• Múltiples citoquinas, incluidas IL-3 y GM-CSF, pueden activar factores de transcripción a través de la fosforilación de la tirosina, que se extiende más allá de los interferones.
• La composición proteica específica del complejo del factor de transcripción activado (p91 vs. 80 kDa) dicta el resultado de la expresión génica aguas abajo.
• Las vías de señalización de citocinas exhiben especificidad en la regulación de la inducción de genes diana, como lo demuestran los efectos diferenciales en la expresión de Fc gamma RI.