Caracterización del intermedio activo de una reacción de plegamiento de proteínas mediada por GroEL-GroES

Área de la Ciencia:

• Biología Molecular Biología Molecular
• La bioquímica es la bioquímica.
• El plegamiento de las proteínas.

Sus antecedentes:

• Las chaperoninas como GroE facilitan el plegamiento de las proteínas.
• Los modelos anteriores sugerían la liberación del sustrato antes de que se completara el plegado.

Objetivo del estudio:

• Para investigar si el plegamiento de proteínas se produce dentro del canal GroEL.
• Determinar el papel del complejo cisternario en el plegamiento mediado por GroE.

Principales métodos:

• Anisotropía de fluorescencia de flujo detenido utilizando un complejo pireno-rodaneso-GroEL.
• Utilizó análogos de ATP no hidrolizables y mutantes GroEL para bloquear la liberación de GroES.

Principales resultados:

• La adición de GroES y ATP indujo cambios rápidos en la flexibilidad del sustrato dentro de GroEL.
• Los sustratos completaron el plegamiento mientras se unían a la chaperonina cuando se inhibió la liberación de GroES.
• La iniciación del plegamiento ocurre en el complejo cisternario.

Conclusiones:

• El complejo cis ternario, con ATP, es un intermediario activo en el plegamiento de proteínas mediado por GroE.
• El plegamiento de proteínas puede completarse dentro del canal GroEL antes de la liberación de GroES.