Control del punto de control mitótico y G2: regulación de la unión a la proteína 14-3-3 por fosforilación de Cdc25C en la serina-21616
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C Y Peng1, P R Graves, R S Thoma
1Department of Cell Biology and Physiology, Washington University School of Medicine, 660 South Euclid Avenue, St. Louis, MO 63110, USA.
Science (New York, N.Y.)
|September 5, 1997
Resumen
La fosforilación de la proteína Cdc25C humana en la serina-216 y la unión a la proteína 14-3-3 regulan negativamente su actividad. Esto identifica a Cdc25C como un objetivo clave en el control del punto de control de células humanas.
Área de la Ciencia:
- Biología celular Biología celular.
- Biología molecular La biología molecular.
- La bioquímica es la bioquímica.
Sus antecedentes:
- El Cdc25C humano es una proteína fosfatasa de doble especificidad crucial para la entrada mitótica.
- Cdc25C desfosforila la proteína quinasa Cdc2 para regular la progresión del ciclo celular.
- Durante la interfase, el Cdc25C se fosforila en la serina-216 y se une a las proteínas 14-3-3.
Objetivo del estudio:
- Para investigar el papel de la fosforilación de la serina-216 y la unión 14-3-3 en la regulación de Cdc25C.
- Para determinar si Cdc25C es un objetivo de las vías de control de daños en el ADN.
Principales métodos:
- Mutagénesis dirigida al sitio para prevenir la fosforilación de la serina-216.
- Sobreexpresión condicional del tipo silvestre y del mutante Cdc25C.
- Evaluación del tiempo mitótico y la integridad del punto de control G2.
- Ensayos de fosforilación in vitro con el uso de Chk1 kinasa.
Principales resultados:
- Una mutación que impide la fosforilación de la serina-216 abolió la unión 14-3-3.
- La sobreexpresión del mutante no fosforilable interrumpió el tiempo mitótico.
- Las células que expresan el mutante escaparon de la detención del punto de control G2 inducida por daño al ADN o estrés de replicación.
- La kinasa Chk1 humana fosforila Cdc25C en la serina-216 in vitro. también en la serina-216 in vitro.
Conclusiones:
- La fosforilación de la serina-216 y la posterior unión 14-3-3 regulan negativamente la actividad Cdc25C humana.
- Cdc25C es un objetivo crítico para los mecanismos de control de puntos de control en las células humanas.
- Esta regulación es esencial para mantener la integridad genómica durante el ciclo celular.