La carga de una proteína Mcm en los orígenes de replicación del ADN está regulada por Cdc6p y CDKs

Área de la Ciencia:

• Biología celular Biología celular.
• Biología Molecular Biología Molecular
• Genética La genética.

Sus antecedentes:

• Los orígenes de la replicación del ADN deben encenderse solo una vez por ciclo celular en los eucariotas.
• Las proteínas de iniciación como Orc, Cdc6 y Mcms están implicadas en la regulación del inicio de la replicación.
• Los mecanismos precisos que controlan el encendido de origen a lo largo del ciclo celular no se comprenden completamente.

Objetivo del estudio:

• Investigar la asociación dependiente del ciclo celular de las proteínas de iniciación con los orígenes de replicación en S. cerevisiae.
• Para aclarar los roles de Cdc6p y Mcm7p en la regulación de la actividad de origen de la replicación del ADN.
• Identificar los mecanismos reguladores que impiden la replicación del ADN.

Principales métodos:

• El enlace cruzado de formaldehído se utilizó para estudiar las interacciones proteína-ADN in vivo.
• La asociación de Cdc6p y Mcm7p con los orígenes de la replicación se evaluó en diferentes fases del ciclo celular (G1, G2, S).
• Se examinó el efecto de la expresión ectópica de Cdc6p en el reclutamiento de Mcm7p.

Principales resultados:

• Cdc6p y Mcm7p se asocian específicamente con los orígenes de la replicación durante la fase G1.
• La asociación de Mcm7p con los orígenes depende de la presencia de Cdc6p.
• La expresión ectópica de Cdc6p permitió la asociación de origen durante G2, pero no reclutó a Mcm7p.

Conclusiones:

• El encendido del origen de la replicación está regulado por al menos dos mecanismos distintos.
• La ocupación de Cdc6p en los orígenes es un requisito previo para la carga de proteínas Mcm.
• La actividad de las cinasas dependientes de ciclina (CDK) de las fases S y M previene la carga de Mcm durante las fases S, G2 y M, asegurando la replicación de ADN una vez por ciclo celular.