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La regulación de la proteasa de muerte celular caspase-9 por la fosforilación
M H Cardone1, N Roy, H R Stennicke
1Program on Apoptosis and Cell Death Research, The Burnham Institute, La Jolla, CA 92037, USA.
Science (New York, N.Y.)
|November 13, 1998
Resumen
La fosforilación de las proteínas regula directamente las caspasas, las proteasas clave de la apoptosis. La quinasa Akt fosforila la pro-caspasa-9 (pro-Casp9) en la serina-196, inhibiendo su actividad y afectando la apoptosis.
Área de la Ciencia:
- Biología Molecular Biología Molecular
- Biología celular Biología celular.
- La bioquímica es la bioquímica.
Sus antecedentes:
- Las caspasas son proteasas intracelulares cruciales que inician y ejecutan la apoptosis.
- La quinasa Akt y la p21-Ras son reguladores conocidos involucrados en las vías de señalización celular.
Objetivo del estudio:
- Investigar el papel regulador directo de la fosforilación de proteínas en la actividad de la caspasa.
- Para determinar si la señalización Akt y Ras influye en el procesamiento y la función de la caspasa-9.
Principales métodos:
- La expresión celular de Ras activo y Akt.
- Preparación de extractos citosólicos.
- Ensayos de fosforilación in vitro con el uso de caspasa-9.9 recombinante.
- Mutagénesis dirigida al sitio de la caspasa-9 (Ser196Ala).
Principales resultados:
- Akt y p21-Ras inducen la fosforilación de la procaspasa-9 en las células.
- El procesamiento inducido por el citocromo c de la procaspasa-9 se vio afectado en las células que expresan Ras o Akt activos.
- Akt fosforila directamente la caspasa-9 recombinante en la serina-196, inhibiendo su actividad de proteasa.
- La mutante pro-caspasa-9 (Ser196Ala) resistió la inhibición y la fosforilación mediadas por Akt, lo que condujo a una apoptosis resistente a Akt.
Conclusiones:
- La actividad de la caspasa puede ser modulada directamente por la fosforilación de proteínas.
- La fosforilación mediada por Akt de la caspasa-9 representa un nuevo mecanismo regulador en la apoptosis.