Una asparaginyl endopeptidasa procesa un antígeno microbiano para la presentación de MHC de clase II

Área de la Ciencia:

• Inmunología Inmunología.
• La proteólisis es la proteólisis.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• El procesamiento de antígenos requiere la descomposición de proteínas extrañas en péptidos dentro de los endosomas / lisosomas para su presentación por moléculas de clase II de MHC.
• Las proteasas específicas responsables del procesamiento de antígenos, en particular para la presentación de la clase II de MHC, siguen sin identificarse en gran medida.
• Las catepsinas lisosómicas generalmente se consideran las enzimas primarias para el procesamiento de antígenos.

Objetivo del estudio:

• Identificar las proteasas clave involucradas en el procesamiento de antígenos de proteínas extrañas para la presentación de células T.
• Investigar el papel de las cisteína endopeptidasas específicas de la asparagina en el procesamiento de antígenos.
• Para determinar el impacto de la N-glucosilación en el procesamiento de antígenos por proteasas específicas.

Principales métodos:

• Los lisosomas purificados de una línea de células B humanas se utilizaron para procesar un dominio del antígeno de la toxina del tétano (TTCF).
• Los inhibidores de péptidos competitivos dirigidos a la asparaginyl endopeptidasa (AEP) de células B fueron diseñados y utilizados para bloquear su actividad in vitro e in vivo.
• El efecto de la N-glicosilación en la actividad de la AEP se evaluó in vitro.

Principales resultados:

• La actividad proteolítica dominante en el procesamiento lisosomal de TTCF fue identificada como una cisteína endopeptidasa específica de asparagina, similar a las asparaginyl endopeptidasas (AEP) de mamíferos, no cathepsinas.
• Los inhibidores de la AEP bloquearon específicamente el procesamiento de TTCF in vitro y retrasaron su presentación a las células T in vivo.
• El preprocesamiento de TTCF con AEP aceleró su presentación, confirmando el papel clave de AEP.
• Se encontró que la N-glucosilación de los residuos de asparagina bloqueaba la acción de la AEP in vitro.

Conclusiones:

• La cisteína endopeptidasa (AEP) específica de la asparagina juega un papel crítico en el procesamiento de antígenos extraños para la presentación de células T, desafiando el papel establecido de las catepsinas.
• Los inhibidores de la AEP pueden modular la presentación del antígeno in vivo.
• La N-glucosilación puede regular el procesamiento de antígenos al prevenir la escisión de la AEP, lo que potencialmente permite un procesamiento preferencial de antígenos microbianos sobre los autoantígenos.