Caracterización molecular del factor que induce la apoptosis mitocondrial

Área de la Ciencia:

• Biología celular Biología celular.
• La bioquímica es la bioquímica.
• Biología Molecular Biología Molecular

Sus antecedentes:

• Las mitocondrias son los reguladores centrales de la apoptosis.
• Las principales proteínas reguladoras de la apoptosis residen en el espacio intermembranar mitocondrial.
• Estas proteínas se liberan para iniciar la cascada de muerte celular.

Objetivo del estudio:

• Para identificar y caracterizar un nuevo factor inductor de la apoptosis (AIF) de las mitocondrias.
• Para aclarar el mecanismo por el cual el FIA induce la apoptosis.
• Para determinar el papel de AIF como un efector mitocondrial en la muerte celular.

Principales métodos:

• Identificación y clonación del gen del FIA.
• La expresión de FIA recombinante.
• Ensayos in vitro utilizando núcleos y mitocondrias aislados.
• Microinyección de AIF en células intactas.
• Evaluación de las vías caspase-dependientes e independientes.

Principales resultados:

• AIF es una flavoproteína de 57.000 MW, homóloga a las oxidorreductazas bacterianas.
• El FIA recombinante induce la condensación de la cromatina y la fragmentación del ADN en núcleos aislados.
• AIF desencadena la liberación del citocromo c y la caspasa-9 de las mitocondrias purificadas.
• AIF induce cambios similares a la apoptosis en las células intactas, independientemente de la actividad de la caspasa.
• La sobreexpresión de Bcl-2 inhibe la liberación de AIF, pero no su actividad apoptótica.

Conclusiones:

• AIF es una nueva proteína mitocondrial que induce directamente la apoptosis.
• AIF actúa como un efector mitocondrial, translocando al núcleo para desencadenar la muerte celular.
• La apoptosis mediada por AIF es independiente de la vía de la caspasa.