ヒューマンUpfタンパク質は,終末コドンから下流に結合すると,ナンセンスメディエイトされた衰退のためにmRNAをターゲットにします

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 細胞生物学 細胞生物学
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• 無意味な媒介による衰退 (NMD) は,重要な細胞監視経路です.
• NMDは,早期終結コドン (PTC) を宿すエウカリオットメッセンジャーRNA (mRNA) を除去する.
• 真のストップコドンからPTCの区別は,シス作用要素,特にエクソン-エクソン結合に依存しています.

研究 の 目的:

• NMD経路に関与する新しいヒトタンパク質を特定し,特徴づけること.
• これらの新たに特定されたNMD因子の細胞の局所化と相互作用を解明する.
• これらのタンパク質がNMDの開始と実行に寄与するメカニズムを調査する.

主な方法:

• 同免疫プレシピテーションは,HeLa細胞抽出物中のタンパク質複合体を検出するための測定法です.
• 健全な細胞における免疫光を用いた細胞下局部化研究.
• スプライスされたβ-グロービンmRNAとのタンパク質関連性の分析 in vivo.
• hUpfタンパク質をβ-グロービンのmRNAの3'未翻訳領域 (UTR) に結合させる機能分析.

主要な成果:

• 3つの新しいヒトNMDタンパク質の識別:hUpf2,hUpf3a,およびhUpf3b.
• 細胞抽出物では,これらのタンパク質はhUpf1.1と複合体を形成する.
• 完ぺきな細胞では,hUpf3aとhUpf3bは核サイトプラズマのシャトリング,hUpf2は環核,hUpf1は細胞プラズマのシャトリングを示す.
• hUpf3aとhUpf3bは,スプライスされたβ-グロービンmRNAと選択的に結合する.
• hUpfタンパク質をβ-グロービンのmRNA 3'UTRに結合させると,NMD.を誘発する.

結論:

• hUpf1,hUpf2,hUpf3a,hUpf3bを含むダイナミックなhUpf複合体は,NMDにおいて中心的な役割を果たしています.
• 複合組成は,mRNAエクソン-エクソン交差点の核で開始される.
• 複合体は,翻訳終端部位のダウンストリームで認識されると,細胞質でNMDを誘発する.
• これらの発見は,真核生物におけるmRNA監視の分子機構に関する新しい洞察を提供します.