Mec1とDdc1のチェックポイントタンパク質が,異なるメカニズムによって二重鎖の断裂に誘導される
1Division of Biological Science, Graduate School of Science, Nagoya University, CREST, Japan Science and Technology Corporation, Chikusa-ku, Nagoya 464-0814, Japan.
まとめ
DNA損傷は細胞サイクル停止とDNA修復遺伝子発現を誘発する. 酵母では,Mec1とDdc1のタンパク質が独立してDNA損傷部位を認識し,異なる損傷認識経路を示唆しています.
科学分野:
- 細胞生物学 細胞生物学
- 分子遺伝学 分子遺伝学
- DNAの修復メカニズム
背景:
- ユカリオット細胞は,DNA損傷時にチェックポイント経路を活性化し,細胞サイクル進行を停止し,DNA修復を開始します.
- 発芽酵母におけるホモタリックスイッチング (HO) エンドヌクレアスは,交配型 (MAT) ロカスで特定の二重鎖の断裂を誘導し,DNA損傷の研究のモデルとして機能します.
研究 の 目的:
- 鍵となるチェックポイントタンパク質であるMec1とDdc1が,HOエンドヌクレアースによって誘発されるDNA損傷の部位に誘導されるメカニズムを調査する.
- DNA損傷認識プロセスにおけるMec1,Ddc1,Rad9,Rad24の相互依存性を決定する.
主な方法:
- 染色体免疫降水 (ChIP) 実験を利用して,MATロカスとのタンパク質関連性を検出しました.
- 局所特異のDNA二重鎖の断裂を誘発するためにHOエンドヌクレアスを発現した.
- 他のチェックポイントタンパク質 (Rad24,Mec1,Rad9) に Ddc1 と Mec1 のリクルートメントの依存性を分析した.
主要な成果:
- Ddc1タンパク質は,HO発現後のMATロカス領域と結合することが判明し,これはRad24に依存するプロセスですが,Mec1やRad9ではない.
- Mec1タンパク質は,Ddc1,Rad9,Rad24と独立して,DNA分裂部位領域とも関連しています.
- これらの発見は,DNA損傷部位にMec1とDdc1の独立した採用を示しています.
結論:
- Mec1とDdc1は,別々の経路でDNA損傷部位に誘導される.
- この研究は,真核細胞におけるDNA損傷認識のための少なくとも2つの異なるメカニズムの存在を示唆している.
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