生きているネズミの心臓レポーター遺伝子発現の光学画像撮影

科学分野:

• バイオメディカルイメージング
• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝子治療は遺伝子療法です.

背景:

• 心臓遺伝子移植の研究は,従来,死後の侵襲的な分析に依存しています.
• 非侵襲的イメージングは,遺伝子発現を追跡する際の利点を提供します.

研究 の 目的:

• 生きたネズミの心臓レポーター遺伝子発現の非侵襲的成像の実現可能性を実証する.
• 心臓における遺伝子転送の時間的・空間的特性を評価するための方法を確立する.

主な方法:

• ネズミは,アデノウイルス発現する火虫ルシフェラーゼ (Ad-CMV-Fluc) の直接心筋内注射を受けた.
• D-ルシフェリン投与後,冷却されたCCDカメラを使用して生物発光成像が行われました.
• レポーター遺伝子の活動は,相対光単位/分 (RLU/min) として定量化されました.

主要な成果:

• 心臓のルシフェラーゼ活性が,トランスデュークション後14日間で減少した.
• 画像法では,Ad-CMV-Fluc.c.のプラーク形成ユニットの1x10(7) までの感度が示されました.
• In vivoイメージングの信号は,in vitroのルシフェラーゼ活性と強く相関していた (r2=0.92).

結論:

• この研究では,生きているネズミの心臓レポーター遺伝子発現の非侵襲的イメージングを成功裏に実証しました.
• 開発されたアプローチは,遺伝子発現の位置,規模,期間をリアルタイムで評価することを可能にします.
• このテクニックは,将来の心臓遺伝子治療の研究を大幅に助けることができます.