マイクロタイタープレートにおける砂糖配列の合成
Fabio Fazio1, Marian C Bryan, Ola Blixt
1Department of Chemistry and Skaggs Institute for Chemical Biology, The Scripps Research Institute, 10550 North Torrey Pines Road, La Jolla, California 92037, USA.
Journal of the American Chemical Society
|November 28, 2002
まとめ
この研究は,クリック化学を使用してマイクロタイタープレートに複雑な炭水化物配列を合成するための新しい方法を示しています. これらの配列は,レクチン相互作用の効率的なスクリーニングと,シアリルルイス x.のような重要なグリカンの酵素合成を可能にします.
科学分野:
- 炭水化物化学 炭水化物の化学
- グライコバイオロジーは,
- 化学生物学 化学生物学とは
背景:
- オリゴサッカライドの合成と表示は,炭水化物とタンパク質の相互作用を理解するために重要です.
- マイクロタイタープレートベースのアッセイは,生物学的スクリーニングのための高通量プラットフォームを提供します.
研究 の 目的:
- マイクロタイタープレート表面に複雑な炭水化物配列を合成し,表示する方法を開発.
- これらの配列をレクチンスクリーニングおよびグリカン酵素の酵素合成に使用します.
主な方法:
- 1,3-二極サイクロアディション (クリック化学) を使用して,オリゴサッカリドをC(14) 炭化水素鎖に固定しました.
- マイクロタイタープレート内のマイクロモラースケールの砂糖配列のインシット合成を行いました.
- ESI-MSを用いた製品形成が確認され,化学的および生物学的分析により収穫量が決定されました.
主要な成果:
- マイクロタイタープレートで様々な複雑な炭水化物 (6-16) を合成し,表示することに成功しました.
- これらの配列を異なるレクチンで効率的にスクリーニングすることが実証されています.
- シアリルルイス x (17) の酵素合成は,プレートで表示される前駆体のフクソシル化によって達成された.
- 阻害剤20の取得されたIC ((50) 値は,溶液相研究と一致しています.
結論:
- 開発された方法は,マイクロタイタープレートで炭水化物配列を生成するための汎用性のあるプラットフォームを提供します.
- このアプローチは,炭水化物-レクチン相互作用の高通量スクリーニングを容易にする.
- 固体基板上で複雑なグリカンを酵素で合成することは可能であり,効率的です.
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