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Updated: Jul 7, 2026
10:23
Using Luciferase to Image Bacterial Infections in Mice
Published on: February 18, 2011
バイシストロニックアデノウイルスベクトル媒介遺伝子配送を用いたマウスの心臓遺伝子発現のマイクロポジトロン放出トモグラフィーイメージング
Ian Y Chen1, Joseph C Wu, Jung-Jun Min
1Crump Institute for Molecular Imaging, UCLA School of Medicine, Los Angeles, Calif 94305-5427, USA.
Circulation
|March 10, 2004
まとめ
この研究では,microPET画像を用いた2つのレポーター遺伝子を同時に追跡するためのビシストロニックアデノウイルスベクターが実証されました. この方法は,心臓組織における遺伝子発現の信頼性のある,相関的なモニタリングを可能にします.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- バイオテクノロジー バイオテクノロジー
- メディカルイマージング (医学イメージング)
背景:
- マイクロポジトロン放出トモグラフィー (microPET) は,ラット心筋における単一レポーター遺伝子発現モニタリングに有効化されています.
- 2つのPETレポーター遺伝子を結びつける新しいバイシストロニックアデノウイルスベクター (Ad-CMV-D2R80a-IRES-HSV1-sr39tk) が開発されました.
- これらの遺伝子には,ネズミの変異ドーパミン2型受容体 (D2R80a) と,内部リボソームエントリーサイト (IRES) を介して接続された変異ヘルペスシンプレックスウイルス1型チミジンキナーゼ (HSV1-sr39tk) が含まれる.
研究 の 目的:
- 2つのPETレポーター遺伝子の同時発現のためのビシストロニックアデノウイルスベクトルの有効性を評価する.
- ウイルスタイターとレポーター遺伝子の活性との相関を in vitro で評価する.
- マイクロPETを用いたラット心筋における二重PETレポーター遺伝子発現のインビボ相関を検証する.
主な方法:
- ネズミのH9c2心筋細胞は,バイシストロニックアデノウイルスベクトルの異なる位数で変換された.
- レポータータンパク質の活性度は,トランスデュークション後48時間後に測定された.
- 無血症のネズミは,アデノウイルスベクターまたは塩溶液の心内注射を受け,その後,各レポーター遺伝子 ([18F]-FESPと[18F]-FHBG) の特定の放射性トレーサを使用した縦線マイクロPETイメージングを行った.
主要な成果:
- カーディオミオブラストにおけるレポーター遺伝子の活動は,ウイルスタイターと相互に強い相関関係を示した (r2 > 0.96).
- In vivoマイクロPETイメージングでは,ネズミの2つのPETレポーター遺伝子の心臓発現レベルとの良好な相関が明らかになった (r2=0.73).
- エクスビボのガンマカウントは,マイクロPET画像から推測されたアデノウイルス媒介のトランスゲン発現の位置を確認しました.
結論:
- IRESベースのビシストロニックアデノウイルスベクトルは,2つのPETレポーター遺伝子の同時モニタリングを可能にします.
- このベクトルシステムは,PETを用いた遺伝子発現の間接的なイメージングのための信頼できる方法を提供します.
- このアプローチは,遺伝子治療の有効性をイメージングするために,レポーター遺伝子を治療用遺伝子に置き換える可能性を秘めています.
