イーストの転写因子IIAのサブユニットをコードする2つの遺伝子の分離
1Fred Hutchinson Cancer Research Center, Seattle, WA 98104.
まとめ
研究者は,トランスクリプション因子IIA (TFIIA) 機能に不可欠な酵母TOA1およびTOA2遺伝子をクローンしました. これらの遺伝子は,RNAポリメラーゼIIの転写と酵母細胞の成長に不可欠なTFIIAサブユニットをコードする.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- イースト遺伝学 イースト遺伝学
- 遺伝子発現の表現について
背景:
- 転写因子IIA (TFIIA) は,RNAポリメラーゼIIの基礎転写機構の重要な構成要素である.
- TFIIAは,in vitroで基礎転写を調節する役割を果たしています.
- TFIIAは32キロダルトンと13.5キロダルトンのサブユニットで構成されています.
研究 の 目的:
- イーストTFIIA.のサブユニットをコードする遺伝子をクローンする.
- クローンされた遺伝子とそのコード化されたタンパク質を特徴付けるため.
- イーストにおけるこれらの遺伝子の機能的重要性を評価する.
主な方法:
- TOA1とTOA2の遺伝子クローニングを行いました.
- 再結合タンパク質の発現と浄化.
- イーストと哺乳類のシステムを用いたin vitro転写アッセイ.
- イースト成長アッセイ. イースト成長アッセイ.
主要な成果:
- TFIIA,TOA1およびTOA2の32および13.5キロダルトンサブユニットをコードする遺伝子は,クローン化に成功しました.
- TOA1もTOA2も,互いに,または既知の遺伝子とのシーケンスの類似性を示しませんでした.
- 再結合TFIIAは,TATA結合タンパク質-DNA複合体と結合する.
- クローンされた遺伝子は,TFIIA.欠乏した in vitro 転写システムを補完した.
- TOA1とTOA2の両方が酵母生存に不可欠であることが判明しました.
結論:
- TOA1およびTOA2遺伝子は,酵母TFIIA.の必須サブユニットをコードする.
- これらの遺伝子は,RNAポリメラーゼIIによる基礎転写に不可欠です.
- クローン化された遺伝子は,TFIIAの機能と調節のさらなる研究のためのツールを提供します.
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